西林瓶菌種打管復活操作步驟
1、用 75%酒精棉擦拭西林瓶表面進行消毒。
2、在生物安全柜中打開鋁制瓶蓋和膠蓋。
3、用無菌吸管吸取 0.5ml 左右液體培養基（《菌種說明書》中固體培養基去掉瓊脂即可)于西
林瓶中將凍干菌粉全部溶解。
4、將溶解后的菌懸液轉移至盛有 4~5mL 液體培養基的試管中混勻，可將殘留在吸管中的 1-2
滴菌懸液轉接至固體培養基上。
5、將液體試管和斜面試管于條件下靜置培養，以液體培養結果為準。

甘油凍存管菌種打管復活操作步驟
1、準備好的菌種培養基（見《菌種說明書》）。
2、將凍存管下半部浸入 37℃溫水中輕輕搖動，使冷凍狀態的菌種懸液迅速融化。如果收到菌
種凍存管時菌懸液是融化狀態則需要立即進行轉接培養。
3、用 75%酒精棉擦拭凍存管表面進行消毒。
4、在生物安全柜中打開凍存管瓶蓋，用無菌吸管吸取全部菌懸液，均勻涂布到 2 支試管斜面
或平板上。
5、將斜面試管或平板于條件下靜置培養。對于生長緩慢的菌種應持續培養 2 周至更長的
時間。

注意事項
1、所有打管操作都需要無菌操作。需由專業微生物技術人員在相應防護設備中進行，生物危
害程度為三類的菌種應在生物安全柜中操作。
2、西林瓶和凍存管打開后需一次用完，不能留存。
3、菌種經過凍干保藏后，處于休眠狀態，需要轉接 2-3 代恢復活力。
4、大部分凍干菌種會在培養幾天后生長。有些菌種第一代恢復生長時會有較長的延遲期，培
養此類菌種時需要將培養時間延長至正常培養時間的雙倍時長，甚至 2 周至更長的時間。

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菌落總數質控樣品使用注意事項

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