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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10×100 μL |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 11804ES80 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
| 主要用途 | 研究 |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
BL21 (DE3) Chemically Competent Cell | 11804ES80 | 10×100 μL | 272.00 |
產品描述
本品是在大腸桿菌 BL21（DE3）菌株基礎上制備的化學轉化感受態細胞，是以 T7 RNA 聚合酶為表達系統的高效蛋白表達宿主。可同時表達T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶，用于 pET 系列，pGEX，pMAL 等質粒的蛋白表達。適合于非病毒蛋白重組表達。使用pUC19檢測轉化效率達107 cfu/μg DNA 以上。
BL21 (DE3)感受態細胞基因型：F-ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3)。
產品組分
編號 | 組分 | 11804ES80 |
11804-A | BL21 (DE3)化學感受態細胞 | 10×100 μL |
11804-B | pUC19 (control vector, 10 pg/μL) | 10 μL |
運輸與保存方法
干冰運輸；-80℃保存，有效期6個月。請勿將本品置于-20℃或者液氮中保存。
注意事項
1） 本產品應保存在-80℃，不可反復凍融，以免降低感受態細胞的轉化效率。
2）本產品在冰中解凍時間不宜過長，感受態細胞剛化凍時轉化效率高。
3） 混入質粒時應輕柔操作。
4） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
5） 本產品僅作科研用途！
使用方法
1. 取100 μL感受態細胞，冰浴、解凍（大約5 min）。
2. 立即向解凍后的感受態細胞懸液中加入目的DNA，輕輕彈勻，冰浴靜置25 min。
【注】：所加DNA體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一。
3. 42℃水浴中熱激45 sec，然后快速將EP管轉移到冰上，靜置2 min。
【注】：此過程不要晃動，否則會降低轉化效率。
4. 向離心管中加入700 μL左右不含抗生素的LB或2YT培養基，混勻后37℃，200 rpm復蘇60 min。
5. 5000 rpm離心1 min收集菌體，留取100 μL左右上清涂布至含有相應抗生素的培養板上，37℃培養過夜。
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