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產品簡介
產品介紹
ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging
內質網藍色熒光探針（活細胞）
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging 內質網藍色熒光探針（活細胞） | 40761ES50 | 50μl | ≤-20℃避光 | 499.00 |
產品描述
ER-Tracker探針是一系列具有細胞膜透過性，對活細胞內質網具有高度選擇性的探針，不像傳統的DiOC6(3)，該系列探針幾乎不對線粒體著色，且在較低濃度即可實現對內質網的染色，且對細胞幾乎無毒性。使用以下提供的優化步驟對活細胞染色后用醛固定，可以部分保留活細胞的染色特征。
本品為ER-Tracker Blue-White DPX，Ex= 374 nm，Em= 430-640 nm，藍色熒光，屬于DapoxylTM（DPX）家族成員之一。DPX系列染料均具有長發射波長、高吸光系數、高量子產量、較大斯托克司頻移等特點。但這些染料具有環境敏感性，會隨之出現極性增強、zui大熒光波長偏移到更高波長處、量子產量下降等現象。
本品為溶于DMSO的1mM ER-Tracker Blue-White DPX儲存液，推薦工作濃度為100nM-1μM。
產品性質
分子式（Formula） | C26H21F5N4O4S |
分子量（Molecular Weight） | 580.53 |
外觀（Appearance） | Yellow Solution |
Ex/Em | 374/430-640nm |
濾片（Filter） | DAPI or UV longpass |
結構式（Structure） |
|
運輸和保存方法
冰袋運輸。≤-20℃避干燥保存，一年效期。避免反復凍融。
注意事項
- 避免反復凍融，可根據單次用量分裝保存。避免將本品儲存于無霜冰箱。
- DMSO有毒，請小心操作。
- 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
本實驗方案經牛肺動脈內皮細胞優化，且已被其他常規細胞系驗證。但不同的細胞類型其*使用條件不同，還需用戶根據該方案進行進一步優化。
- 試劑準備
使用前將ER-Tracker Blue-White DPX 回溫至室溫，并簡短離心使該DMSO溶液至管底。
2. 細胞樣品處理及染色
2.1 將1mM ER-Tracker Blue-White DPX儲存液按照實驗要求稀釋至工作濃度，推薦工作濃度100nM-1μM。建議在不影響實驗結果的前提下盡量使用較低濃度探針，以避免由于濃度過高染色導致的假象。
注：使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s 平衡鹽溶液（HBSS/Ca/Mg）稀釋該探針進行染色，可得到*實驗結果。
2.2 染色
對于貼壁細胞，吸除培養皿中培養基，用HBSS清洗細胞，加入預熱的染料工作液于37℃孵育細胞15-30min。吸除染色液，加入不含探針的新鮮培養液，并在熒光顯微鏡下觀察細胞。【注】：由于ER-Tracker Blue-White DPX探針具有較高光敏感性，會產生波動較大的發射吸收峰值，使用長通DAPI濾光片效果。 另，操作過程中需盡量避光。
細胞如需固定，請參考以下步驟。
3． 細胞固定及透化處理
3.1 固定細胞：用4%甲醛于37℃固定細胞10-20min。
【注】：已染色細胞用醛固定后，僅部分ER-Tracker Blue-White DPX留在細胞內，熒光信號會有部分衰減。
3.2 （可選）透化處理：若細胞還需進行后續染色，需對細胞利用0.2% TritonX-100 透化10min。
3.3 清洗觀察細胞：細胞固定后，可用合適緩沖液進行清洗，每次5min，共2次。鏡檢即可。
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