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太實用了！轉染試劑常見問題大全，你想要的答案這里都有
Hieff Trans™ Liposomal Transfection Reagent 脂質體核酸轉染試劑
（向下滑動查看詳細解答方案）
血清的存在會影響脂質體的形成，建議配制核酸轉染試劑復合物時采用無血清培養(yǎng)基（一般推薦MEM 培養(yǎng)基）。
轉染試劑能否凍存？
不能。本試劑一定要4 ℃保存，要注意避免反復多次長時間開蓋，長時間開蓋會導致脂質體氧化而影響轉染效率。
使用Hieff Trans™脂質體核酸轉染試劑需要注意什么？
1）細胞鋪板密度較高，以90%-95%為佳；
2）使用高純度的DNA有助于獲得較高的轉染效率；
3）制備轉染復合物時要求用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉染試劑；
4）轉染的時候培養(yǎng)基中不能添加抗生素；
5）試劑應該在4度保存，要注意避免多次反復長時間開蓋；
6）初次使用應優(yōu)化DNA濃度和陽離子脂質體試劑量以得到最大的轉染效率。DNA 和轉染試劑的比例，通常推薦是1:2-1:3。
不需要。脂質體復合物可以穩(wěn)定存在6個小時。如果在進行轉染前沒有進行細胞換液，為了保證細胞正常生長所需的營養(yǎng)，需要在4～6小時后換用新的培養(yǎng)基。但如果轉染之前已進行過換液則在脂質體轉染后不需要進行再次換液。
若想提高轉染效率，應該注意什么？
1）轉染時細胞的密度，90%-95%。
2）轉染時，核酸和脂質體稀釋液要用MEM無血清培養(yǎng)基。
3）轉染后4-6h可選擇換液。
可否進行DNA和siRNA的共轉染？效果如何？
DNA和siRNA的共轉染時候，siRNA轉染效率差。
轉染試劑可否進行慢病毒包裝的轉染呢？
慢病毒包裝是可以的，但是在進行慢病毒包裝的效率不一定和轉染的效率有關，同時還跟包裝質粒的選擇和質粒間的比例有關系。
懸浮細胞轉染是否可以用Hieff Trans™脂質體核酸轉染試劑？
Hieff Trans™脂質體核酸轉染試劑可以用于懸浮細胞轉染，具體操作可見Protocol。另外，我們還推出了專門用于懸浮細胞的轉染試劑（Cat No. 40805, 懸浮細胞專用脂質體核酸轉染試劑）。
Hieff Trans™ siRNA/miRNA體外轉染試劑
（向下滑動查看詳細解答方案）
DNA轉染和siRNA轉染有什么不同？
1）siRNA由于只有二十幾個堿基對，相比DNA幾千上萬對堿基，小了許多。
2）用于轉染DNA的轉染試劑和方法并不適用于轉染siRNA。
3）siRNA轉染比DNA轉染對轉染試劑細胞毒性的要求嚴格。
轉染試劑轉染后需要換液嗎？
對于換液可以區(qū)分兩種情況：
1）轉染之前如果沒有換液應在轉染6 小時左右后換液，以保證細胞生長所需營養(yǎng)。
2）如果轉染之前如果有換液，可以按照平時等到培養(yǎng)基出現營養(yǎng)不足時換液。
PEI轉染試劑轉siRNA和質粒的效率如何？
不可凍存，因為轉染試劑是一種PEI陽離子轉染試劑，低溫下凍存，會破壞PEI轉染試劑的活性，因此是4 度儲存，保持的轉染效能。
若想提高轉染效率，應該怎么操作？
1）轉染時細胞的密度，90%-95%。
2）轉染時，siRNA和脂質體稀釋液要用Opti-MEM 無血清培養(yǎng)基。
3）轉染后4-6h 可選擇換液。
Polyplus品牌轉染試劑
（向下滑動查看詳細解答方案）
與許多其他轉染試劑相反，在有血清的環(huán)境下，jetPRIME的效率更高。因此，轉染復合物可以直接加到含血清培養(yǎng)基的細胞中。
DNA/jetPRIME的比值是什么意思？
該比值指的是每微克DNA相對應的jetPRIME微升數。例如，DNA/jetPRIME比值為1: 2意思是每微克DNA加2微升jetPRIME。
在jetPRIME轉染的過程中可以使用抗生素嗎？
jetPRIME的轉染效率不受抗生索的影響。jetPRIME的常規(guī)批次質檢都是在含血清和抗生索的培養(yǎng)基中進行的。
優(yōu)化的第1步是將DNA的量增加1.5倍。我們也推薦增加DNA/jetPRIME比值(每μg的DNA，2-3μl jetPRIME)。另一種方法是緩慢離心培養(yǎng)板(5 min at 210g)。
是否可以不在意細胞密度？
細胞密度和傳代次數將影響轉染效率。我們推薦細胞融合度在60%至80%。對于使用jetPRIME的轉染優(yōu)化條件，請參見jetPRIME轉染說明書中的Table1，根據不同培養(yǎng)板推薦的細胞數。此外，如果細胞已經培養(yǎng)很長時間(超過20代)，我們建議從液氮中取1管新細胞，重新進行培養(yǎng)。
對于所有細胞可以使用相同的條件嗎？
已優(yōu)化的jetPRIME操作步驟可用于多種細胞，例如A549, MCF7, U-2 OS, NIH-3T3, B16-F10, Caco-2等。但是，我們也提供了針對具體細胞的特異性操作步驟，以便獲得更高的轉染效率。這些具體條件可以參見Polyplus cell transfection database。
當我想在一個實驗中進行多個質粒的共轉染時，我該如何操作？
對于多個質粒的共轉染，每孔DNA的總量不應超過說明書中標明的DNA量。每個質粒的比例根據質粒的大小、結構和期望的每個質粒的表達水平來應用。在每孔中，每個質粒至少應占總DNA量的10%。
