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—— 致力于簡化熒光定量實驗進程的性能怪獸
Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix用Universal ROX替代了傳統ROX,彌補不同儀器平臺的光程差,實現了適合所有qPCR儀器。另外,該產品采用抗體法修飾,同時配方添加了基因擴增的促進因子,大大提升了該產品的擴增性能。
產品特點
全儀器平臺通用:預混特定類型參比染料,無需調整ROX濃度;
易于示蹤:藍色預混液,觀察顏色可直接區分是否加樣;
強穩定性:室溫配制體系,配制后的體系可4℃放置24 h,檢測結果無變化;
上機快速:兼容常規程序與快速程序,最快46 min完成定量實驗;
擴增性能好:擴增效率高,特異性好,可檢測個位拷貝數基因。
產品優勢
圖1. Hieff UNICON® Universal Blue 預混液可實現全平臺通用。針對不同儀器平臺,與T品牌對比,Hieff UNICON® Universal Blue 預混液Ct值起峰更加靠前。以2 µL的質粒10倍梯度稀釋液為模板,擴增IL23R基因。
靈敏度高,可檢測低至單拷貝的質粒DNA
圖2.Hieff UNICON® Universal Blue 預混液可有效檢測7個數量級范圍的模板量,擴增效率高,可在寬廣的線性范圍內獲得良好的線性關系。以2 µL的106-100拷貝/µL的質粒為模板,擴增人IL23R基因。
檢出率和特異性良好,廣泛適用于不同GC含量基因
圖3. Hieff UNICON® Universal Blue預混液可實現不同引物的高特異性擴增。 以293T細胞cDNA為模板,利用Primer5軟件設計200 bp擴增長度的片段(GC%含量30%-70%)的引物共1000對,隨機挑選27對,使用Hieff UNICON® Universal Blue預混液檢測引物的擴增效率和反應特異性,在寬廣的基因GC范圍內,該預混液可保證*的特異性基因檢出。
靈敏度高,可檢測低至單拷貝的質粒DNA
圖4. Hieff UNICON® Universal Blue預混液可精準分辨2倍表達量差異,且具備良好的重復性 A: 以293T細胞cDNA原液進行2倍梯度稀釋,擴增GAPDH基因,Hieff UNICON® Universal Blue預混液可精準區分2倍模板濃度差異。B: 以293T細胞20倍cDNA稀釋液為模板,擴增GAPDH基因,設置90個復孔,Ct值標準偏差<0.2。
兼容快速程序與標準程序
GC含量 | 30% | 40% | 50% | 55% | 60% | 65% | 70%-1 | 70%-2 |
標準程序 | 24.95 | 24.175 | 23.79 | 15.615 | 23.22 | 23.675 | 24.905 | 28.21 |
快速程序 | 25.39 | 24.435 | 23.995 | 15.835 | 23.915 | 23.655 | 25.16 | 29.27 |
△Ct值 | 0.44 | 0.26 | 0.21 | 0.22 | 0.70 | -0.02 | 0.25 | 1.06 |
圖5.Hieff UNICON® Universal Blue預混液可大大縮短擴增時間 以293T細胞cDNA的20倍稀釋液為模板,分別使用標準程序和快速程序擴增不同GC的基因片段(30%-70%),結果顯示,可兼容標準程序和快速程序,縮短擴增時間。對于個別△Ct>0.5的基因建議使用標準程序。
良好的穩定性,讓體系配制更加靈活
4℃體系保存 | 0h | 24h | 48h | 72h |
Ct均值 | 23.29 | 23.33 | 23.33 | 23.04 |
△Ct值 | 0.04 | 0.04 | -0.25 |
圖6. Hieff UNICON® Universal Blue預混液在體系配制后4℃放置不同時間條件下,檢測人C2orf68基因擴增情況。結果顯示體系配制后4℃保存24 h,擴增性能無變化。
翌圣qPCR mix已發表文獻(部分)
【1】Yu Qiong, et al. "RNA demethylation increases the yield and biomass of rice and potato plants in field trials." Nature biotechnology. (2021): doi:10.1038/S41587-021-00982-9. (IF=54.908)
【2】Dong, W., et al. "An SHR–SCR module specifies legume cortical cell fate to enable nodulation." Nature. (2020). (IF=42.778)
【3】Lu, X. Y., et al. "Feeding induces cholesterol biosynthesis via the mTORC1–USP20–HMGCR axis." Nature (2020):1-6. (IF=42.778)
【4】Bi, X., et al. "Tracing the genetic footprints of vertebrate landing in non-teleost ray-finned fishes." Cell W1(2021). (IF=38.637)
【5】Liu, S. , et al. "RNA polymerase III is required for the repair of DNA double-strand breaks by homologous recombination." Cell 184.5(2021). (IF=38)
【6】Liu, C. X., et al. "Structure and Degradation of Circular RNAs Regulate PKR Activation in Innate Immunity." Cell (2019). (IF=31.398)
【7】Han, X., et al. "Mapping the Mouse Cell Atlas by Microwell-Seq." Cell 172.5(2018):1091-1107.e17. (IF=30.410)
訂購信息
產品定位 | 產品名稱 | 貨號 | 規格 | 目錄價/元 |
高靈敏通用型定量預混液(SYBR Green法) | Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix | 11184ES08 | 5 mL | 663 |
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HB210926