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直接PCR——PCR反應中的快速之“王”
PCR技術是一種包括生命科學在內多個領域頻繁使用的一種技術。而PCR技術在發展過程中有了幾次大的技術革新,如熱穩定Taq酶的發現、自動控溫PCR儀的推出、PCR mix的出現,每一次革新的出現都使得PCR技術更加簡便與易于操作。
Part1:直接PCR所謂何意?
直接PCR(Direct PCR)是一種不經核酸提取而直接使用動物或植物組織等直接進行擴增的反應。在許多方面,直接PCR的工作方式類似于常規PCR。主要區別是直接PCR中使用的定制緩沖液,樣本可不經過核酸抽提,直接進行PCR反應,但對于參與直接PCR反應酶的耐受性和buffer的兼容性有相對應的要求。盡管常見的樣品中或多或少都會存在PCR抑制劑,但在酶和buffer的作用下直接PCR仍可實現可靠的擴增。而傳統的PCR反應需要以高質量的核酸為模板進行反應,如模板中含有蛋白以及其他雜質時就會抑制PCR反應的順利進行。
Part2“直”接了當
核酸提取技術愈發成熟,對應所需要的配套儀器就越固化,技術的一體化導致單次的檢測成果過高。而一些欠發達地區的并不具備成熟的核酸提取配套儀器及實驗室,以及在性疾病流行大背景下,直接PCR的需求劇增。
目前的PCR檢測方法所需時間較長,樣品如咽拭子、血液等需經核酸提取后再進行檢測及報告發放,整體拉長了診斷時間。直接PCR使用簡單,不需要額外培訓專業的檢測人員,可直接將樣品簡單稀釋即可同時還避免了因如核酸提取操作等出現的假陰性結果。
Part 3: 狀況“直”出
早在1993年之前,直接PCR就被用于微生物領域中分析中,今天分子實驗室中所采用的菌落PCR鑒定就是直接PCR法的直接的體現。可直接樣品簡單處理或者稀釋即可進行PCR反應。
2019年新///冠病毒出現,并且迅速席卷造成重大損失。隨后非洲豬瘟又卷土重來,造成生豬產業的重大損失。想要控制疫情,檢測是重中之重。而在此次的疫情期間,分子檢測揭開了其神秘的面紗進入人們的視野中。一方面是疫情期間分子檢測的需求攀升,另一方面是攀升的需求使得衛生機構的運行負荷驟增。因此開發快速檢測技術是各家IVD企業爭相搶奪的高地。而直接PCR更是快速分子檢測技術中的一匹黑馬。
直接PCR的核心就是具有高度耐受的聚合酶,可直接對樣本中的核酸分子進行檢測。翊圣生物研發的直接PCR系列具有優////秀的耐受抑制組分,有針對不同樣品如動物組織、動物全血等PCR產品,助力快速檢測。
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
Animal Blood Direct PCR Kit (With Dye) 全血直接PCR試劑盒 | 10186ES50/70 | 50/200 T |
2×Hieff Unicon® Blood Direct TaqMan SNP Genotyping Kit 熒光定量血液直擴TaqMan SNP分型預混試劑盒 | 13100ES60 | 100 T |
2×Hieff® C2P3 Blood Direct TaqMan qPCR Master Mix血液直擴熒光定量試劑盒 | 13094ES10 | 10 mL |
2×Hieff® C38P1 Blood Direct Multiplex PCR Master Mix 2×C38P1血液直擴多重PCR預混液 | 13187ES08 | 5 mL |
HB200910