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細胞蛋白磷酸酶1(PP1)活性定磷比色法定量檢測

閱讀:2202          發布時間:2015-4-7
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要用途


 細胞蛋白磷酸酶1(PP1)活性定磷比色法定量檢測試劑是一種旨在使用特異性底物糖原磷酸化酶a在PP2A抑制劑存在下,受到PP1去磷酸化后,釋放出游離磷酸根,與孔雀綠染料發生顯色反應后,采用比色法測定其峰值的變化,以此進行測算單位酶活性的而經典的技術方法。該技經過精心研制、成功實驗證明的其適合于各種細胞裂解懸液樣品包括免疫沉淀復合物和粗提或部分純化酶樣品蛋白磷酸化酶1活性及其抑制劑的檢測。廣泛應用于細胞凋亡、蛋白組學、病理生理學、神經病變等研究。產品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,反應優化,檢測敏感。


技術背景


蛋白磷酸化酶1(protein phosphatase 1;PP1;EC 3.1.3.48),又稱為1型蛋白絲/蘇氨酸磷酸化酶,是7個主要絲/蘇氨酸磷酸化酶(包括PP1、PP2A、PP2B、PP2C、PP4、PP5、PP6)成員之一,從酵母到人類高度進化保留。其參與調節多種重要的細胞生理功能包括糖原代謝、細胞分裂、肌肉收縮、信號傳導、神經元功能、轉錄、翻譯等以及與HIV-1轉錄過程的調節并且與老年性癡呆等多種疾病密切相關PP1分子結構表面的3個凹槽及β 12-β 13 Loop環結構是底物與抑制劑的結合部位;其催化亞體為37kd,調節亞體有2種:目標亞體和抑制亞體。基于特異性底物糖原磷酸化酶a,在PP2A抑制劑福司曲星fostriecin;FOS)存在的情況下,受到蛋白磷酸化酶1的去磷酸化作用,釋放出游離磷酸根,與孔雀綠(malachite green)染料發生顯色反應后,在分光光度儀下(660nm波長)產生峰值的變化,由此測定蛋白磷酸化酶1(PP1)的特異活性。

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