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上海哈靈生物科技有限公司>技術文章>細胞γ分泌酶活性熒光共振能量轉移法(FRET)定量檢測試劑盒

技術文章

細胞γ分泌酶活性熒光共振能量轉移法(FRET)定量檢測試劑盒

閱讀:1851          發布時間:2016-6-24

主要用途

   我公司細胞γ分泌酶γ-SECRETASE)活性熒光共振能量轉移法(FRET)定量檢測試劑是一種旨在通過熒光探針NMA供體DNP受體雙重標記的多肽底物,在γ分泌酶水解作用下,釋放出強烈熒光的NMA,而發生熒光峰值的變化,即采用熒光共振能量轉移法來測定樣品中活性的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品(動物、人體)、部分或*純化酶樣品中γ分泌酶活性的定量檢測,以及抑制劑激活劑的篩選。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定,安全可靠。

注意事項

  • 本產品為25次操作,包括標準液
  • 建議使用膜蛋白樣品為佳(推薦使用細胞可溶性膜蛋白(粗提)制備試劑盒
  • 操作時,須戴手套
  • 系統操作過程中,標準液測定只需1次
  • 樣品須澄清,至關重要
  • 孵育反應完成后即刻進行熒光測定
  • 熒光濾波器可以使用激發波長在340-360nm,散發波長440-450nm
  • 待測樣本為粗提酶樣品,其蛋白濃度為20微克/20微升;膜蛋白樣品,為50微克/20微升;細胞裂解懸液,為100微克/20微升(本公司提供  Bradford蛋白質濃度定量試劑盒)
  • 如果待測樣品濃度過高或過低,可以調整樣品濃度
  • 相對熒光讀數RFU(Relative Fluorescence Unit)越高,表明酶活性越
  • 用戶可以使用γ分泌酶抑制劑L685,458(IC50=17納摩爾)作為抑制劑對照或陰性對照
  • γ分泌酶活性單位濃度定義:在37℃溫度下,pH 6.8條件下,每分鐘內能夠水解釋放1摩爾熒光產物NMA所需的酶量作為一個活性單位
  •  
  • 本公司提供系列蛋白酶檢測試劑產品
  • 如:
  • 組織γ分泌酶(γ-SECRETASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒

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