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肉堿（L-Carnitine） ELISA 試劑盒

需要而未提供的試劑和器材

1.   37℃恒溫箱。

2.   標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

3.   精密移液器及一次性吸頭

4.   蒸餾水，

5.   一次性試管

6.   吸水紙

肉堿（L-Carnitine） ELISA 試劑盒

注意事項(xiàng)

1.   從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.   各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差

3.   建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測。

4.   嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

5.   為避免交叉污染，要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。

6.   不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

7.   底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。

酶與抗體交聯(lián)，常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標(biāo)記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行，標(biāo)記效果好，特別適用于實(shí)驗(yàn)室的小批量制備。其標(biāo)記程序?yàn)椋簩?μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中，加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉（NaIO4）水溶液0.5ml，混勻置4℃冰箱30分鐘 ， 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml，室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml，混勻并裝透析袋，以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時(shí)（或過夜）使之結(jié)合，然后吸出，加硼氫化鈉（NaBH4）溶液（ 5(g/ml)0.2ml，置4℃冰箱2小時(shí)，將上述結(jié)合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液，置4℃冰箱30分鐘后離心，將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中，并對之透析過夜（4℃），次日離心除去不溶物，即得到酶標(biāo)抗體，用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml，進(jìn)行測定后，冷凍干燥或低溫保存。