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標簽： 大鼠 主動脈 內皮細胞 細胞培養
大鼠血管內皮細胞培養可以：（1）用于血液流動性、防止血栓形成、調節血管張力等研究；（2）用于選擇性通透性以及免疫調節等方面研究。
實驗方法
- 貼塊法
| 實驗方法原理 | 貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養，其方法較酶消化法簡便、經濟。但缺點使易混有成纖維細胞和平滑肌細胞，前者的貼壁時間和內皮接近，后者貼壁較內皮慢，而且會被肝素所抑制。 |
|---|---|
| 實驗材料 | 雄性Wistar大鼠 |
| 試劑、試劑盒 | DMEM 胎牛血清 內皮細胞生長因子 肝素鈉 青鏈霉素 明膠 胰蛋白酶 PBS D-Hanks’液 |
| 儀器、耗材 | 手術器械 眼科剪 眼科鑷 培養皿 手術刀 培養瓶 CO2培養箱 |
| 實驗步驟 | 一、實驗方法
|
| 其他 | 一、實驗討論
植塊培養法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養，其方法較酶消化法簡便、經濟。但缺點使易混有成纖維細胞和平滑肌細胞，前者的貼壁時間和內皮接近，后者貼壁較內皮慢，而且會被肝素所抑制。
而由于成纖維細胞生長較快，隨著傳代次數越多，其污染的程度越重，從而使培養失敗。因而，抑制和減少成纖維細胞是大鼠主動脈內皮細胞培養的關鍵問題。本法采用的方法是：
組織塊貼塊的時候，不可避免會有一些塊貼的方向不是內膜面，那么zui后將爬不出內皮，甚至長出較多雜質細胞，需刮除。
另外，部分塊即使大小合適，方向也正確，也可能爬不出來，去除組織塊的時候，應該以大局為重，看到內皮細胞已經爬出較多，而雜質細胞也開始爬出的時候，就要果斷地去除組織塊了。72 h 只是個大概的時間，初學者不可以拘泥。 |
