成骨細胞礦化結節染色液(四環素法)

產品簡介：

在成骨分化過程中，其最基本的生物學特征是骨基質合成、分泌、礦化及成熟，而礦化結節是成骨細胞分化成熟的標志，同時也是成骨細胞行使成骨功能的主要形態學表現，觀察成骨細胞的礦化結節是研究成骨細胞分化的常用手段之一。 成骨細胞礦化結節染色常用方法有四環素法和茜素紅S法，四環素染色法是利用四環素與礦化結節中的鈣鹽形成熒光的磷酸復合物，可用熒光顯微鏡觀察。

NobleRyder 成骨細胞礦化結節染色液

產品組成：

自備材料：  

1、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS,無鈣鎂)

2、培養基

3、蒸餾水

4、熒光顯微鏡

操作步驟(僅供參考)：

1、成骨細胞經培養，yi酶消化，接種培養于6孔板中，每孔有1x105個細胞。

2、培養基中添加1%-2%四環素溶液，細胞連續觀察、換液，培養14天。

3、小心吸除培養液，磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次。

4、加入足量Ob固定液固。

5、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2。

6、加入DAPI染色液染色5-8min。

7、輕輕吸除染色液,用磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次,每次。

8、直接在熒光顯微鏡快速觀察，或抗熒光封片劑封片后再觀察。

染色結果：

注意事項：

1、四環素溶液為無菌溶液，可以一次性分裝小份保存，注意避免染菌；使用時常溫溶解后與培養基按1:100比例混合后使用。

2、Ob固定液宜揮發，開啟后應密封保存。

3、DAPI染色后應盡快觀察，以免熒光消失，影響觀察。也可以用抗熒光淬滅封片劑處理。

4、DAPI不宜反復凍融，否則容易失效。且對人體有一定刺激性，請注意做好防護。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：6個月有效。

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