G418溶液(geneticin,20mg/ml)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

新霉su(geneticin, G418)又稱(chēng)遺傳霉素，是一種氨基糖苷類(lèi)抗生素, 是*常用的細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染抗性篩選試劑。G418能阻斷蛋白質(zhì)合成，對(duì)細(xì)菌、酵母、高等植物以及哺乳動(dòng)物細(xì)胞均具有氨基糖苷類(lèi)毒性，用于真核細(xì)胞從轉(zhuǎn)座子Tn5和Tn601穩(wěn)定轉(zhuǎn)染新霉su(neo)抗性基因的選擇和維持，經(jīng)常用于基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面。

NobleRyder G418 solution經(jīng)過(guò)濾除菌，一般工作濃度為50～1000ug/ml不等，不同類(lèi)型的細(xì)胞需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)確定優(yōu)良濃度。在具有相對(duì)穩(wěn)定基因組的細(xì)胞(如CHO細(xì)胞)中，一旦篩選出穩(wěn)定細(xì)胞株后，無(wú)需加入G418即可繼續(xù)培養(yǎng)。 

NobleRyder G418溶液(geneticin,20mg/ml) 

產(chǎn)品組成：

主要成分：主要由G418、HEPES等組成，過(guò)濾除菌。
操作步驟（僅供參考）：
1、 由于每種細(xì)胞對(duì)G418的敏感性不同，而且不同批次的G418的活性液不同，所以在篩選之前，需要確定G418的優(yōu)良篩選濃度，一般在50～1000μg/ml范圍內(nèi)進(jìn)行篩選。
2、 將細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液，并稀釋到1000個(gè)/ml。
3、 加入不同量的G418 solution (20mg/ml)，選擇在10~14天內(nèi)使細(xì)胞全部死亡的*低G418濃度來(lái)進(jìn)行下一步的篩選試驗(yàn)。
注意事項(xiàng)：
1.盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效。
2.加藥篩選約5～7天左右，細(xì)胞會(huì)大量死亡，為了減少死亡細(xì)胞對(duì)陽(yáng)性克隆的不利影響以及增加陽(yáng)性克隆的獲得率，可以應(yīng)用套環(huán)法或刮除法結(jié)合有限稀釋法來(lái)篩選陽(yáng)性克隆。加藥后，在高倍鏡下，刮除陰性克隆，消化陽(yáng)性克隆后繼續(xù)篩選培養(yǎng)?；蛘哂锰篆h(huán)套住陽(yáng)性克隆，在套環(huán)內(nèi)加yi蛋白酶消化，把消化液吸到另外一個(gè)新的孔中培養(yǎng)，最后再用有限稀釋法把陽(yáng)性克隆在96孔板中篩選。
3.注意無(wú)菌操作，盡量避免污染。
4.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期： 6個(gè)月有效。

NobleRyder G418溶液(geneticin,20mg/ml)