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上海士鋒生物關于新型熒光蛋白RSFP新進展的介紹
點擊次數：1763 發布時間：2013-6-5
近年來，隨著新型熒光探針和成像方法的改進，光學成像的分辨率得到了極大的改進。但是可逆光轉化熒光蛋白RSFP的發展較為滯后，品種極其單一。近日來自中科院生物物理研究所，北京大學等處的研究人員，通過一種光轉化熒光蛋白mEos2的隨機突變，獲得了一系列具有光開關功能的綠色熒光蛋白，這將有助于推動現階段光開關熒光蛋白（RSFP）的發展。相關成果發表在2月28日的《美國國家科學院院刊》（PNAS）雜志上。
與傳統的光不敏感熒光蛋白（比如GFP，RFP）領域相比較，可逆光轉化熒光蛋白RSFP的發展較為滯后，品種極其單一。現有的發綠色熒光的RSFP僅僅有Dronpa家族的幾個蛋白和剛剛開發出來的rsEGFP。而Dronpa在進行PALM/STROM成像時，單個分子所發出的光子數比較低，成像分辨率差。
在本次研究中，中科院徐濤課題組通過一種光轉化熒光蛋白mEos2的隨機突變，獲得了一系列具有光開關功能的綠色熒光蛋白，命名為mGeos。這些熒光蛋白都可以被405 nm激光所激活，被488 nm激光關閉，并且可以反復開關多次。新型光開關熒光蛋白mGeos-M, C, L, S, F and E都具有非常良好的熒光亮度，zui亮的mGeos-C的亮度相當于EGFP的1.86倍（熒光蛋白亮度用消光系數和量子產率的乘積來表示）;mGeos-E同時具有光控開關和pH值敏感性，類似于熒光蛋白pHluorin。
借助（F）PALM/STORM平臺，徐濤課題組還深入研究了新型熒光蛋白的單分子性質。結果發現，新型熒光蛋白mGeos-M擁有十分的單分子性質，是目前已知的單分子釋放出的光子數zui多的綠色熒光蛋白，其單分子的定位精度可以達到10 nm左右。（F）PALM/STORM成像發現，與傳統的熒光蛋白Dronpa相比，mGeos-M標記的微絲效果更好。