IPTG異丙基-β-D-硫代半乳糖苷（Sigma/Merck），訂購： 56980388！

中文名稱: 異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷

中文別名：異丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷,異丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖甙

商品名稱: Isopropyl β-D-1-Thiogalactopyranoside

英文簡稱: IPTG

產品別名: Isopropyl β-D-Thiogalactoside

CAS : 367-93-1

產品純度: Sigma ≥99%, Merck ≥98% 

產品性狀: 白色或白色粉末,溶于水后呈清亮無色液體

分 子 式: C9H18O5S

分 子 量: 238.30

保存溫度: 2-8°C冷藏保存 ,配制好后保存于-20°C，室溫可放置一個月

主要作用：異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）是一種作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩(wěn)定,因此被實驗室廣泛應用

IPTG是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質。基于這個特性，當pUC系列的載體DNA（或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA）以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時，如果在平板培養(yǎng)基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互補性，可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。此外，它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。

誘導原理

首先

    E.coli的乳糖操縱子（元）含Z、Y及A三個結構基因，分別編碼半乳糖苷酶、透酶和乙酰基轉移酶，此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調節(jié) 基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白，后者與O序列結合，使操縱子（元）受阻遏而處于關閉狀態(tài)。在啟動序列P上游還有一個分解（代謝）物基因激 活蛋白（CAP）結合位點。由P序列、O序列和CAP結合位點共同構成lac操縱子的調控區(qū)，三個酶的編碼基因即由同一調控區(qū)調節(jié)，實現(xiàn)基因產物的協(xié)調表達 。

其次

   在沒有乳糖存在時，lac操縱子（元）處于阻遏狀態(tài)。此時，I序列在PI啟動序列操縱下表達的Lac阻遏蛋白與O序列結合，阻礙RNA聚合酶與P序列結 合，抑制轉錄起動。當有乳糖存在時，lac操縱子（元）即可被誘導。在這個操縱子（元）體系中，真正的誘導劑并非乳糖本身。乳糖進入細胞，經β-半乳糖苷酶催化，轉變?yōu)榘肴樘恰：笳咦鳛橐环N誘導劑分子結合阻遏蛋白，使蛋白構象變化，導致阻遏蛋白與O序列解離、發(fā)生轉錄。異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的作用與半乳糖相同，是一 種作用*的誘導劑，不被細菌代謝而十分穩(wěn)定，因此被實驗室廣泛應用。

使用方法

    首先把IPTG配制成24 mg/ml（100 μM）的水溶液，并進行過濾除菌后保存。然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基。當DNA段插入至pUC系列載體（或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體），然后轉化至lacZ缺失細胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養(yǎng)基，可根據(jù)長出菌體的藍白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。

作用

誘導外源基因的表達，普遍應用于原核表達系統(tǒng)，使其表達量增高，產物穩(wěn)定，具有易鑒定，易純化的優(yōu)點。

注意事項 ：

   ◆培養(yǎng)噬菌體時，Top agar中的添加量為：25 μl/3 ml（24 mg/ml）

   ◆含有IPTG的培養(yǎng)基4℃避光保存，須在1~2周內使用。

包裝報價： 產品來自Sigma/Merck公司

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IPTG異丙基-β-D-硫代半乳糖苷（Sigma/Merck）