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詳細介紹
具體步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養箱。每15min搖晃一次，消化時間根據腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網過濾細胞，收集；
6. 用培養基重懸，置于培養箱培養。
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 大鼠角膜上皮細胞 |
組織來源 | 眼角膜組織 |
商品貨號 | A01X1724 |
種屬來源 | 大鼠 |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
細胞簡介 | 大鼠角膜上皮細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜 的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以 保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣 。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細 胞層。其主要功能如下：①角膜是無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白 的功能，分三層細胞層，外層即是上皮細胞；②角膜上皮細胞能參與先天性免疫，能感應 病原體存在并發出信號從而激活角膜防御系統；③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角 膜上皮細胞的體外培養對研究角膜的生理學、病理學、免疫學以及分子生物學都是極為重 要的手段，常用于研究細胞代謝產物、病毒感染、各種生長因子和藥物對細胞生長的影響 。 |
包被條件 | 鼠尾膠原I（2-5μg/cm2） |
培養基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
傳代特性 | 可傳1-2代 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5% |
注意事項：
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通。
原代細胞培養：
原代細胞（Primary cells）：是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養的細胞。這里的組織主要指：組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養：由于原代細胞生長緩慢，繁殖一定的代數停止生長（一般10代以內）。所以一般認為：培養的原代的第1和傳代到第10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。
公司產品僅供科研研究實驗
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