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技術文章

懸浮細胞的凍存及液氮罐使用說明

閱讀:903          發布時間:2022-4-19

懸浮細胞的凍存:

1. 直接將細胞收集到離心管。

2. 200g 離心5min,棄上清。

3. 以生長培養基(含20%胎牛血清)或100%胎牛血清重懸細胞至終濃度約107/ml,加入10%的DMSO。

4. 以每管1ml分裝至凍存管中。

5. 置于4oC 30 min,再轉入-20℃ 2h后,再放入-80℃冰箱冷凍過夜,次日保存到液氮罐中;或置于程序降溫盒中,按相關的操作指南進行操作。

液氮罐使用注意事項:

1.初次使用前檢查容器內膽是否清潔干燥,外部有無凹陷及嚴重碰傷,如有輕微凹陷及碰傷,經試驗其蒸發性能不變,仍可繼續使用,如性能下降,應停止使用,避免經濟損失。

2.液氮容器應放在陰涼干燥處,應有良好的通風,不應放置在靠近熱源,陽光直照,以及風口處,嚴禁放置液氮容器的房間緊閉門窗,以免室內因液氮蒸發使氧氣含量下降,造成呼吸困難。

3.只能用于充裝液氮,凍存細胞和病毒用,嚴禁充裝液氧等易燃易爆及腐蝕性液體,以免產生猛烈燃燒、爆炸或對容器產生腐蝕。  液氮是超低溫液體(-196℃),在充裝時,要穿長袖工作服、帶皮手套,以避免液氮飛濺造成凍傷。  貯存容器不得作貯運容器使用。若運輸液氮。必須使用B型貯運容器。因此類容器有特殊支撐結構,堅固可靠不易損壞。

4.液氮容器在使用過程中,每天都應隨時檢查容器的使用情況,如發現容器瓶蓋上和上部有水珠或結霜情況,說明容器質量出現問題,應立即停止使用。

5.存入取出樣品要標記,拿取東西要輕拿輕放。






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