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熒光顯微鏡下的細胞紅綠燈

發布時間:2022-12-06

  

熒光顯微鏡下的細胞紅綠燈

近日,“新國標紅綠燈"、“新版紅綠燈"話題引發熱議,直沖各大平臺熱搜榜,很多人紛紛驚呼這設計是要搞出大量交通事故,幸好證實是虛驚一場,這種設計只會在少數情況下使用,不會推廣。在細胞中,其實也存在運輸系統和紅綠燈,可以用熒光顯微鏡可視化觀察,相關研究還曾獲2013年諾貝爾獎,比新版紅綠燈有意思,一起來了解下吧!

熒光細胞.jpg


細胞中的“車輛"和“高速公路"

細胞內細胞器的定位、遷移和胞內物質運輸,依賴于馬達蛋白和微管(Microtubule,簡稱MT)的相互作用,前者相當于“車輛",而后者相當于“高速公路"。2013年詹姆斯·羅斯曼、蘭迪·謝克曼和托馬斯·聚德霍夫3位科學家因發現細胞中囊泡轉運機制,獲得了2013年諾貝爾生理學或醫學獎。


細胞中的高速與車輛.jpg


細胞中的車輛和高速公路①



細胞內細胞器的定位、遷移和胞內物質運輸,依賴于馬達蛋白和微管(Microtubule,簡稱MT)的相互作用,前者相當于“車輛",而后者相當于“高速公路"。2013年詹姆斯·羅斯曼、蘭迪·謝克曼和托馬斯·聚德霍夫3位科學家因發現細胞中囊泡轉運機制,獲得了2013年諾貝爾生理學或醫學獎。


馬達蛋白.jpg


兩種馬達蛋白在微管上相向而行②



馬達蛋白有非常多種,通常關注的有兩種,動力蛋白Dynein和驅動蛋白Kinesin,兩種“車輛"運動方向剛好相反,前者主要負責從細胞的周圍到細胞的中心運載細胞器和囊泡等貨物,后者主要負責從細胞的中心到細胞的中心運載貨物,順便會把前者帶出來。


熒光顯微鏡如何看到細胞中的車輛和公路?


細胞微觀蛋白.jpg


熒光顯微鏡下的細胞微管(紅)和動力蛋白(綠)②



動力蛋白、驅動蛋白和微管的相關研究通常在小鼠、果蠅等模式生物或培養細胞上進行,微管可以使用Tubulin紅色熒光標記染色,動力蛋白和驅動蛋白一般利用GFP標記為綠色,由于觀察目標非常小,因此一般建議使用MF43-N等研究級正置熒光顯微鏡,搭配高放大倍數、高數值孔徑的60X油鏡或100X油鏡。


成像延時攝影.jpg


熒光成像延時攝影②



為了觀察和記錄動力蛋白/驅動蛋白隨時間移動的情況,還需要用到類似MC50-S等高靈敏度的顯微鏡相機,進行延時攝影或視頻錄制,比如每300ms左右拍攝一張圖片或抽取視頻幀,然后多張圖片疊加,即可分析出移動路徑。


細胞交通中的紅綠燈MAPs

神經元熒光成像.jpg


明美MC50-S相機下的神經元熒光成像



動力蛋白、驅動蛋白的運輸運動,受微管相關蛋白MAPs(Microtubule-Associated Protein)調節,因此MAPs蛋白又被稱為“細胞交通中的紅綠燈",利用熒光標記技術,可以實現神經元的MAPs清晰成像。


神經元成像綠.jpg


明美MC50-S相機下的熒光成像




在神經細胞領域,目前已經發現MAP2、tau和MAP1b等微管相關蛋白MAPs會影響動力蛋白、驅動蛋白,在小鼠活體實驗中單獨敲除單個MAP不一定導致問題,表明這些MAPs可能有互補關系,就像紅綠燈壞掉其中一個,并不會讓交通信號無法判斷。


細胞紅綠燈.jpg


MAP1B變異(綠)導致神經元退化(紅)③



但基因突變等問題導致MAPs異常,就可能引發神經元退化等問題,比如MAP1B變異導致神經元退化、tau蛋白異常磷酸化導致阿茲海默癥,這就像紅綠燈異常亮起,紅黃綠全亮,車輛就摸不著頭腦該走還是該停了。


相關研究還在繼續深入中


研究級熒光顯微鏡.jpg


熒光顯微鏡MF43-N



“細胞紅綠燈"非常有意思,值得深入,相關研究還在繼續進行中,因為需要活細胞成像,因此研究級熒光顯微鏡在其中依舊扮演著重要的角色,如果您有需要進行相關的研究,我們推薦使用明美MF43-N正置熒光顯微鏡,成像質量高,使用方便,近年也有多位老師使用這款顯微鏡完成了高質量論文的發布,您和驚艷的熒光成像效果,可能就只差一通電話和一場試用。
附錄:
①Source:learn.genetics.utah.edu
②DOI:10.1242/jcs.115.7.1453 Source:PubMed
③DOI: 10.1523/JNEUROSCI.2757-14.2015 Source: PubMed
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來源:https://www.mshot.com/article/1547.html


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