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GB/T 29661-2013 化妝品中尿素含量的測定 酶催化法

范圍
本標準規定了化妝品中尿素含量的測定方法——酶催化法。
本標準適用于化妝品中尿素的定量測定，其定量下限為0.025%。

原理
樣品在偏酸性條件下，所含尿素被尿素酶分解為銨鹽，用酸滴定，由此計算尿素含量。

試劑和材料
除另 有規定外，試劑均為分析純。水為 GB/T 6682 規定的三級水。
尿素酶: 0.5g以下可將0.25 g尿素于40°C~45°C在1h內*分解。按照產品說明保存。
0.1mol/L鹽酸: 配制方法按 GB/T 601。
0.1mol/L NaOH溶液: 稱取0.40g NaOH固體，溶于100mL水中。
無水乙醇。
塑料薄膜。

儀器和設備
高型燒杯，100mL。
酸式滴定管。
超聲波清洗儀。
磁力攪拌器。
pH計: 精度0.01。
分析天平: 感量0.01g。
恒溫水浴鍋。

分析步驟
試樣制備
水劑類、乳液類、膏霜類(O/W)樣品
稱取均勻樣品0.5g(精確至0.01g)于高型燒杯中，加入50mL水，用塑料薄膜封口，超聲提取20min。
將高型燒杯放在磁力攪拌器上，邊攪拌邊滴加鹽酸中和至pH4.0(用pH計, 不計量, 若溶液呈pH<4.0，則需滴加NaOH溶液到pH>4.0，再用鹽酸中和至pH4.0，加入0.2g粉碎較細的尿素酶立即用塑料薄膜封口，置于 50°C水浴中不時的搖晃，30min后取出冷卻至室溫，邊攪拌邊用0.1mol/L的鹽酸滴定至pH4.0，記錄消耗的0.1mol/L鹽酸標準溶液的體積V₁。同時做一空白試驗，記錄消耗的0.1mol/L鹽酸標準溶液的體積V₀。
膏霜類(W/O)、油溶性樣品
稱取均勻樣品0.5g(精確至0.01g)于15mL離心管中，加10mL無水乙 醇，超聲提取20min。以不低于5000r/min離心15min，將上清液全部轉移至高型燒杯中，再加入40mL水，搖勻。
余下步驟與"水劑類、乳液類、膏霜類(O/W)樣品"相同。
唇膏類樣品
稱取均勻樣品0.5g(精確至0.01g)于15mL離心管中，加10mL無水乙醇，在80°C水浴中加熱3min~5min使唇膏融化，渦旋1min，超聲提取20min。以不低于5000r/min離心15min，將上清液全部轉移至高型燒杯中，再加入40mL水，搖勻。
余下步驟與"水劑類、乳液類、膏霜類(O/W)樣品"相同。
平行試驗
按上述步驟，對同一樣品進行平行實驗測定。

結果計算算
按式(1)計尿素含量，以%表示:

式中:
60.06 ——尿素的相對分子質量；
V₁ ——樣品消耗0.1mol/L鹽酸標準溶液的體積，單位為毫升(mL)；
V₀ ——空白試驗消耗0.1mol/L鹽酸標準溶液的體積，單位為毫升(mL)；
c   ——0.1mol/L鹽酸標準溶液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
m  ——試驗樣品質量，單位為克(g)。
計算結果保留至小數點后1位。
注: 若檢測尿素含量超過20%，需要以減少樣品稱樣量的方式重新進行測定。


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