分光光度計是用不連續的波長采樣反射物體或透射物體的一種測量儀器。由于不同物體分子的結構不同,對不同波長光線的吸收能力也不同,因此,每種物體都具有特定的吸收光譜。能從含有各種波長的混合光中,將每一種單色光分離出來,并測量其強度的儀器叫做分光光度計。紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長,通常利用氘燈照明。其用途如下:
1.檢定物質
根據吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是最大吸收波長λ-max和摩爾吸收系數ε是檢定物質的常用物理參數。這在藥物分析上就有著很廣泛的應用。在國內外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長和吸收系數載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。
2.與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質,則兩者的光譜圖應*一致。如果沒有標樣,也可以和現成的標 準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確,精密度高,且測定條件要相同。
3.比較最大吸收波長吸收系數的一致性
4.純度檢驗
5.推測化合物的分子結構
6.氫鍵強度的測定
實驗證明,不同的極性溶劑產生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑。
7.絡合物組成及穩定常數的測定:
8.反應動力學研究
9.在有機分析中的應用
有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結構測定的科學,它是在有機化學和分析化學的基礎上發展起來的綜合性學科。
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