微生物無菌檢測操作規(guī)程如下：

　　

　　1、無菌室應(yīng)配備無菌操作間和緩沖間。無菌操作間潔凈度達(dá)到10000級。室內(nèi)溫度保持在20-24℃，濕度保持在45-60%。超凈臺的潔凈度應(yīng)達(dá)到100級。

　　

　　2、無菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁雜物，防止污染。

　　

　　3、嚴(yán)格防止所有滅菌設(shè)備和培養(yǎng)基受到污染，被污染者應(yīng)停止使用。

　　

　　4、無菌室應(yīng)配備工作濃度的消毒劑，如5%甲酚溶液、70%酒精、0.1%溴潔爾敏溶液等。

　　

　　5、無菌室應(yīng)定期用適當(dāng)?shù)南緞┻M(jìn)行消毒清潔，確保無菌室的潔凈度符合要求。

　　

　　6、所有需要帶入無菌室的儀器、器具、盤子等物品，應(yīng)包扎嚴(yán)實，并采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行滅菌。

　　

　　7、進(jìn)入無菌室前，工作人員必須用肥皂或消毒液洗手，然后在緩沖間更換專用工作服、鞋帽、口罩和手套（或用70%乙醇再次擦手）。

　　

　　8、使用無菌室前，必須打開無菌室紫外線燈照射滅菌30分鐘以上，同時打開超凈臺進(jìn)行吹氣。手術(shù)后應(yīng)及時清理無菌室，并用紫外線燈消毒20分鐘。

　　

　　9、微生物無菌檢測前，試品外包裝應(yīng)保持完好，不得打開，以防污染。檢查前，用70%酒精棉球?qū)ν獗砻孢M(jìn)行消毒。

　　

　　10、每次操作時應(yīng)做陰性對照，檢查無菌操作的可靠性。

　　

　　11、吸菌液時，必須用耳球吸。不要用嘴直接接觸吸管。

　　

　　12、微生物無菌檢測前后，接種針必須進(jìn)行火焰燃燒消毒，待培養(yǎng)物冷卻后才能接種。

　　

　　13、吸管、試管、培養(yǎng)皿等帶有菌液的器皿，用含5%來蘇爾溶液的消毒桶浸泡消毒，24小時后取出清洗。若菌液灑在桌面或地面上，應(yīng)立即用5%石炭酸溶液或3%來蘇爾溶液將其傾倒在污染處至少30分鐘后再進(jìn)行處理。工作服、帽子被菌液污染時，應(yīng)立即脫下，高壓蒸汽滅菌后清洗。

　　

　　15、所有帶有活菌的物品必須經(jīng)過消毒后才能在水龍頭下清洗。嚴(yán)禁污染下水道。每個月應(yīng)在無菌室檢查菌落數(shù)。打開超凈工作臺后，取數(shù)個內(nèi)徑為90mm的無菌培養(yǎng)皿，注入約15ml溶化并冷卻至約45℃無菌操作的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，放入30～35℃培養(yǎng)箱中48凝固后數(shù)小時，取3～5塊板分別放在工作位置的左、中、右。開蓋暴露30分鐘后，放入30～35℃培養(yǎng)箱中48小時，取出檢查。100級潔凈區(qū)平板雜菌平均數(shù)不得超過1個菌落，10000級潔凈室平均菌數(shù)不得超過3個菌落。超過限值時，對無菌室進(jìn)行*消毒，直至重復(fù)檢查符合要求。