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美國abi7500pcr儀使用方法講解
Q:7500快速定量PCR儀可以使用0.2ml PCR反應管或者96孔板嗎?
A:不可以，7500 快速定量PCR儀只支持0.1ml PCR反應管或者96孔板
Q:如何監控反應體系是否有蒸發?
A:查看Rox信號是否在整個PCR過程中保持一致。在多組分圖譜界面，選擇單孔，如果Rox信號逐漸增高，代表樣品孔中有蒸發。如下圖所示:
Q:內參基因與目標基因是否需要在相同的反應板上運行相對定量?
A:是，內參基因必須和目標基因在相同的反應板上。軟件可以根據在相同反應板上的內參基因和目標基因自動進行相對定量計算，并計算估值區間。
Q:定量PCR系統支持的熒光染料有哪些?
A:下面是實時定量PCR儀器能夠檢測染料的表:
DYE | 7300 | 7500 | 7900 |
Cy3™ |
| X |
|
Cy5™ |
| X |
|
FAM™ | X | X | X |
JOE™ | X | X | X |
NED™ | X | X | X |
ROX™ | X | X | X |
SYBR® Green I | X | X | X |
TAMRA™ | X | X | X |
Texas Red® |
| X |
|
TET™ |
|
| X |
VIC® | X | X | X |
Q:用戶是否可以添加自定義染料?
A:可以，可以添加自定義染料，但染料的激發和發射波長必須與儀器的濾光片設置兼容。
Q:常用熒光染料的發射波長為多少?
A:
染料名稱 | 發射波長(nm) |
FAM™ | ~520 |
SYBR® Green I | ~520 |
TET™ | ~540 |
JOE™ | ~550 |
VIC® | ~550 |
NED™ | ~580 |
CY3™ | ~580 |
TAMRA™ | ~580 |
ROX™ | ~610 |
Texas Red® | ~610 |
CY5™ | ~670 |
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