詳細介紹
甘露醇高鹽瓊脂
英文名稱:Manitol Salt Agar
培養基的過濾澄清
液體培養基必須澄清,瓊脂培養基也應透明無顯著沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。
瓊脂培養基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃ 的培養基放入大的三角燒瓶內,裝入量不得超過燒瓶容量的1/ 2 ,每1000ml 培養基加入1-2個雞蛋的蛋白.強力振搖3-5 分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。
若能自行沉淀者,亦可靜置冰箱中1-2日、吸取其上清液即可。
培養基 - 成分
培養基的成分包括:碳源、氮源、礦物質,以及其他必需物質。這些成分通過生物反應過程,生物物質、生物化工產品,并放出CO2、H2O和熱量。 培養基的成分還可以由發酵過程中所需的元素出發,如C、H、O、N、S、P、Mg、K等。此外,必要時還有一些需要量很少的微量元素,如Fe、Zn、Cu、Mn、Co、Mo、B等。在發酵過程中某些生物本身不能合成的物質,如氨基酸、維生素或核苷酸等,必要時亦作為營養物質加入到培養基中。
碳源
具有雙重作用。生物在產生生物物質或生物化工產品過程中,它不僅為其提供碳源,也為其提供能源。碳水化合物是微生物發酵中的主要碳源,包括淀粉、葡萄糖、蔗糖和乳糖等。此外,植物油如豆油、棉籽油、玉米油等亦常被應用作為碳源。這類油常與表面活性劑合用,以消除發酵過程中所產生的泡沫。甲醇可用以生產單細胞蛋白。正烷烴類可用以生產有機酸、氨基酸和維生素等,甚至二氧化碳也可作為光合細菌的碳源。
氮源
包括無機氮源和有機氮源。無機氮源包括氨、銨鹽及硝酸鹽等,它們在被應用時應注意發酵中pH的變化;有機氮源包括氨基酸、蛋白質及尿素等,有機氮源的加入往往加快了生物的生長。因考慮到成本因素,一些有機氮源,如黃豆餅粉、花生餅粉、棉籽餅粉、玉米漿、魚粉、酵母粉等常被選用。
培養基的組成中除了水分外,碳源和氮源的含量是zui大的。碳源含量一般不超過10%,氮源含量較低,一般碳氮比應為3~4:1。碳、氮源含量不能過高的原因是避免產生基質或產物對反應的抑制和因滲透壓過高引起細胞失水而死亡。