詳細(xì)介紹
甘露醇卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ)
英文名稱:Egg-Yolk Mannitol Salt agar Base
培養(yǎng)基的過濾澄清
液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無顯著沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。
瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時(shí)、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復(fù)過濾。如過濾法不能達(dá)到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃ 的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶?jī)?nèi),裝入量不得超過燒瓶容量的1/ 2 ,每1000ml 培養(yǎng)基加入1-2個(gè)雞蛋的蛋白.強(qiáng)力振搖3-5 分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。
若能自行沉淀者,亦可靜置冰箱中1-2日、吸取其上清液即可。
培養(yǎng)基的滅菌
一般培養(yǎng)基可采用121℃ 高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。
某些畏熱成分,如糖類,應(yīng)另行配成20% 如或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體液和抗生素等則應(yīng)從無菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50℃ 左右的培養(yǎng)基中。
瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出、待冷至55-60℃時(shí),擺置成適當(dāng)斜面、待其自然凝固。
培養(yǎng)基的質(zhì)量測(cè)試
每批培養(yǎng)基制備好以后.應(yīng)仔細(xì)檢查一遍:如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去。并測(cè)定其zui終pH。將全部培養(yǎng)基放入36±1℃ 恒溫箱培養(yǎng)過夜,如發(fā)現(xiàn)有菌生長(zhǎng),即棄去。用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1-2 管或瓶培養(yǎng)基,培養(yǎng)24- 48 小時(shí),如無菌生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次,如結(jié)果仍同前,則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去,不能使用。
培養(yǎng)基的保存
培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處,能放于普通冰箱內(nèi)。放置時(shí)間不宜超過一周,傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制各記錄副頁(yè)或明顯標(biāo)簽。