詳細介紹
甘露醇卵黃培養基基礎
英文名稱:Egg-Yolk Mannitol Salt agar Base
培養基的過濾澄清
液體培養基必須澄清,瓊脂培養基也應透明無顯著沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。
瓊脂培養基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃ 的培養基放入大的三角燒瓶內,裝入量不得超過燒瓶容量的1/ 2 ,每1000ml 培養基加入1-2個雞蛋的蛋白.強力振搖3-5 分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。
若能自行沉淀者,亦可靜置冰箱中1-2日、吸取其上清液即可。
培養基的滅菌
一般培養基可采用121℃ 高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養基制備方法中,如無特殊規定,即可用此法滅菌。
某些畏熱成分,如糖類,應另行配成20% 如或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術、定量加于培養基。明膠培養基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和抗生素等則應從無菌操作技術抽取和加入于經冷卻約50℃ 左右的培養基中。
瓊脂斜面培養基應在滅菌后立即取出、待冷至55-60℃時,擺置成適當斜面、待其自然凝固。
培養基的質量測試
每批培養基制備好以后.應仔細檢查一遍:如發現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養基沾染等、均應挑出棄去。并測定其zui終pH。將全部培養基放入36±1℃ 恒溫箱培養過夜,如發現有菌生長,即棄去。用有關的標準菌株接種1-2 管或瓶培養基,培養24- 48 小時,如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次,如結果仍同前,則該批培養基即應棄去,不能使用。
培養基的保存
培養基應存放于冷暗處,能放于普通冰箱內。放置時間不宜超過一周,傾注的平板培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基制各記錄副頁或明顯標簽。