詳細(xì)介紹
●ELISA試劑盒,ELISPOT試劑盒
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠甲基化酶
英文名稱(chēng):Mouse Methylase ELISA KIT
可測(cè)種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、猴、馬…
可測(cè)標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液
規(guī)格:96T/48T 中英文雙版說(shuō)明書(shū) 提供代測(cè) 科研試劑
經(jīng)營(yíng)品牌:RD、保存條件:2-8℃
酶標(biāo)儀的使用過(guò)程中的一些問(wèn)題:
1.閾值可疑范圍的設(shè)定 一般酶標(biāo)儀閾值矩陣設(shè)定可設(shè)定陰性、可疑、陽(yáng)性3個(gè)范圍。有經(jīng)驗(yàn)表明可疑范圍的設(shè)定要設(shè)定為臨界上下15%(也稱(chēng)灰色區(qū))為宜;同時(shí)陰性范圍下限和陽(yáng)性范圍應(yīng)該充分考慮到影響ELISA結(jié)果因素的存在,可疑范圍上限必須考慮到雙波長(zhǎng)情況下出現(xiàn)負(fù)吸光度值和超范圍報(bào)告影響結(jié)果的可能性。“灰色區(qū)”的結(jié)果的真實(shí)性是ELISA定性測(cè)定中zui需要把握的環(huán)節(jié),也是實(shí)驗(yàn)室引起醫(yī)療糾紛的主要方面,因此必須對(duì)可疑結(jié)果進(jìn)行復(fù)檢,用兩種試劑盒。
2.樣板程序文件設(shè)定 一個(gè)實(shí)驗(yàn)室同一試驗(yàn)可能使用不同廠家試劑盒,但不同試劑盒規(guī)定的設(shè)定對(duì)照數(shù)量、閾值判定標(biāo)準(zhǔn)等均可能不*,酶標(biāo)儀所設(shè)樣板程序也不*。為了使用方便,可在樣板程序文件中用后綴加以區(qū)別。
ELISA原理實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)要點(diǎn):
在應(yīng)用ELISA時(shí),首先要清楚下面內(nèi)容:1,是檢測(cè)抗體還是抗原?2,檢測(cè)的結(jié)果是定性還是定量?3,是否需要檢測(cè)特異抗體的類(lèi)型?4,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?
(1)檢測(cè)抗原 zui常用于檢測(cè)抗原的方法是非競(jìng)爭(zhēng)性的雙抗體夾心法,其次是競(jìng)爭(zhēng)法。但競(jìng)爭(zhēng)法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難,特別是檢測(cè)微生物的抗原,因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原,這對(duì)于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在競(jìng)爭(zhēng)法中,酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),可影響ELISA的結(jié)果。
(2)檢測(cè)抗體 檢測(cè)抗體種類(lèi)常用的方法是檢測(cè)抗體種類(lèi)的捕獲法,這個(gè)方法常用于檢測(cè)特異性IgG、IgA和IgM.。這個(gè)方法的*步是捕獲所需要檢測(cè)的一個(gè)種類(lèi)的抗體,接下來(lái)是檢測(cè)捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測(cè)IgG時(shí)比較簡(jiǎn)單,但不適用于檢測(cè)其他種類(lèi)的抗體,因?yàn)檠逯腥绻刑禺怚gG存在將與IgM或IgA等競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗原。
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