国产一级a毛一级a看免费视频,久久久久久国产一级AV片,免费一级做a爰片久久毛片潮,国产精品女人精品久久久天天,99久久久无码国产精品免费了

上海研謹(jǐn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年

13585717991

實(shí)驗(yàn)代做
細(xì)胞及相關(guān)培養(yǎng)
進(jìn)口血清
酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒
分離液、分離液試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品
蛋白質(zhì)技術(shù)服務(wù)
生化試劑
Peprotech細(xì)胞因子
動(dòng)物疾病類(lèi)檢測(cè)試劑盒
食品安全檢測(cè)試劑盒
抗體
實(shí)驗(yàn)耗材

用超聲波破碎儀破碎大腸桿菌注意事項(xiàng)

時(shí)間:2015/1/12閱讀:1851
分享:

用超聲波破碎儀破碎大腸桿菌注意事項(xiàng)
用大腸桿菌表達(dá)外源蛋白,在進(jìn)行超聲波破碎之前,用含有1%triton-X-100的PBS懸浮,效果較好,1%triton-X-100的作用還是很明顯的,對(duì)其他的一些細(xì)菌同樣起作用,比如鏈霉菌。 
細(xì)菌沉淀直接加樣品1 buffer,再加5μl的巰基乙醇,混勻,離心,煮沸10min,直接上樣,染色脫色步驟如下:將膠放入適量的染色液微波爐里加熱1min(下次適當(dāng)補(bǔ)點(diǎn)醋酸即可),將染色液換成大量的水(自來(lái)水即可)在微波爐煮10min 就可以。在表達(dá)重組蛋白后超聲波破碎細(xì)胞,采用冰浴,400w,破2s停1s,但是不一會(huì)就產(chǎn)生大量泡沫,影響了破碎功率, pbs和tris緩沖液都是這樣,zui后都是破碎不*,而我的目的蛋白就在這些未破碎的細(xì)胞中。
1*會(huì)產(chǎn)生氣泡是因?yàn)槟愕奶筋^位置沒(méi)放好。超聲波破碎儀探頭一定要接近底部,約1cm(推薦是距底部0.5mm)。功率根據(jù)儀器不同會(huì)有所不同,但你可以觀察液面,有波動(dòng)但不要太劇烈就好。
2*破3s停10s,破碎20-30個(gè)循環(huán)觀察效果。 
3*探頭位置擺放也要注意,聽(tīng)聲音如果不對(duì)的話就要及時(shí)調(diào)整。另外可以從菌濃度方面考慮。 在超聲波破碎時(shí)試著加大體積,振幅不要超過(guò)60%. 
4*嘗試超8s停8s,對(duì)有些菌體蛋白來(lái)說(shuō),通常方法很難散熱,導(dǎo)致蛋白變性產(chǎn)生氣泡,停頓時(shí)間稍長(zhǎng)一些,這種情況多見(jiàn)于包涵體形式的蛋白。如果換用Branson超聲波破碎儀來(lái)進(jìn)行工作,由于熱耗較小,停頓周期可適當(dāng)減小。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 荣昌县| 连平县| 韶关市| 德清县| 义乌市| 吴忠市| 普格县| 巴彦县| 龙山县| 兴安盟| 盘山县| 封丘县| 阿鲁科尔沁旗| 江山市| 柯坪县| 页游| 喀喇| 曲沃县| 保靖县| 文成县| 刚察县| 花莲县| 独山县| 明水县| 利津县| 娱乐| 晋江市| 酉阳| 大名县| 西吉县| 兴隆县| 会昌县| 聂拉木县| 丘北县| 电白县| 东乡县| 沈阳市| 大田县| 怀化市| 溧阳市| 京山县|