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高壓蒸汽滅菌法（autoclaving） 可殺滅包括芽胞在內的所有微生物,是滅菌效果好、應用廣的滅菌方法.方法是將需滅菌的物品放在高壓鍋（autoclave）內,加熱時蒸汽不外溢,高壓鍋內溫度隨著蒸汽壓的增加而升高.在103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸汽壓下,溫度達到121.3℃,維持15～20分鐘.適用于普通培養基、生理鹽水、手術器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的滅菌.