如何液相色譜系統的良好工作狀態?
液相色譜系統的維護和保養方法:
一、液相色譜系統的流動相
保持貯液瓶清潔,定期清洗或更換;盡量使用HPLC級溶劑和試劑;含有緩沖鹽和非HPLC級的流動相一定要過濾;含有緩沖鹽的流動相應現用現配,防止微生物生長和組分改變。
1、更換流動相注意事項:
液相色譜常用的流動相包括多種有機溶劑、水、各種緩沖溶液等,它們之間存在互溶性的問題,同時也存在緩沖溶液鹽析出的問題。
2、更換互溶性流動相將新流動相置于儲液瓶中:
a. 打開放空閥,啟動泵使新的流動相從放空閥出口流出20mL左右。
b. 關閉放空閥,然后將進樣閥與色譜柱相連接端卸開,用小容器放置于進樣閥的出口處。
c. 啟動恒流泵,讓流動相從進樣閥出口流出10mL左右。
d. 重新連接色譜柱,設定適當流速,當流動相流出約30倍于色譜柱體積,并且檢測器基線平衡后,流動相更換完畢。
3、更換非互溶性流動相:
a. 用中介溶劑更換泵中的舊流動相(不要接色譜柱)。
b. 如果色譜柱中流動相也需要更換,用該溶劑沖洗色譜柱。
c. 用新流動相更換中介溶劑。
4、更換緩沖液流動相:
a. 用5%~20%甲醇水更換色譜系統中緩沖液(包括色譜柱) 。(非常重要)
b. 用新流動相更換過渡溶劑。
c. 由于一般緩沖液遇到甲醇、異丙醇等高含量有機溶劑混合液時容易將緩沖液中的鹽結晶出來,而結晶鹽對密封圈、柱塞桿以及進樣閥內部轉子和定子都有很大的損壞,也容易阻塞輸液管路,因此要特別仔細操作。
d. 用緩沖液作流動相或一段時間不使用泵,照以上步驟更換溶劑,然后用純甲醇或乙腈沖洗。
二、泵頭
泵的密封圈是泵較容易磨損的部件
1、泵的密封圈的維護保養:
每天要把泵中的緩沖液沖洗干凈,防止鹽沉積;用HPLC級試劑;用燒結不銹鋼吸液過濾頭;
2、進樣閥
較易磨損:轉子密封
3、保養事項:
a、樣品進樣前要過濾;
b、停機后要用溶劑沖洗干凈進樣器內殘留樣品和緩沖鹽;
c、不要用氣相色譜用的尖頭針進樣。
4. 檢測器
保持檢測器清潔,每天與色譜柱一同清洗;
用脫過氣的流動相,防止空氣卡在檢測池內;
檢測器燈有一定壽命,不用時不要打開燈。但也不能夠經常開關燈。
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