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葡聚糖凝膠色譜柱選擇條件：
梯度洗脫在Sephadex使用中并不象在正相柱層析中那么重要。首先你的樣品須要能溶解在盡量少量的洗脫劑中。極性在的用甲醇水系統;極性小者一般用不含水的系統。我們實驗室常用正己烷二氯甲烷甲醇系統，用了很多年，效果較好。
（2） 飽和層析柱：
用洗脫劑將凝膠搖勻，直立柱身，讓其自然沉降，此時要防止氣泡留在其中。至少半小時打開開關，流出幾個柱體種的洗脫劑，目的是使其膨脹在正確比例的洗脫劑中。
（3） 樣品處理：用盡量少的洗脫劑溶解樣品，常壓過濾。
（4） 濕法上柱。這也是要有技巧的步驟。
（5） 洗脫：控制流速，一般1drop/s以下，可參見廠家的一些參數;必要時更改極性（很多時一個極性就可以將樣品洗脫完畢）。
再生以備下次使用。
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