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技術文章

支原體即霉形體的培養

閱讀:1251          發布時間:2010-2-26

解脲脲原體(UU)是耐酸不耐堿的,UU培養的原理是在于其菌體中含有脲酶,而UU培養基中含有尿素,UU的生長需要其本身的脲酶分解尿素益提供其自身生長所需要的營養物質,UU培養基中含有指示劑酚紅,由于尿素被分解釋放出氨從而使培養基變堿而使培養基由黃變紅,但是這種紅是一種清亮的紅色,透明澄清無渾濁,UU其適宜的PH值為6.2-6.5,由于尿素分解產氨是PH上升,UU在PH值大于7的條件下會迅速死亡,因此,在培養時要隨時觀察其液體培養基的PH值,一旦看到培養基變紅,要立即取出,以防培養基PH上升導致UU死亡,一般UU需要在培養至對數生長期時是活力zui強的時候(培養基呈橙紅色變化)。一般UU生長需要24小時。

另外,UU生長所需要的培養基的成分一般每隔單位有所不同,但是有一點肯定,就是需要小牛血清。

解脲脲原體培養基配制:(在自制培養基基礎上加:)PH:6。13
  小牛血清:30ml/250ml
  10%尿素:12 ml/250ml
  0.2%酚紅:4。5 ml/250ml
  青霉素G:50萬U/250ml
  酵母:6。25 g/250ml
  磷酸二氫鉀:0。375 g/250ml
  天門冬素:0。025 g/250ml

自制培養基包括:新鮮牛肉浸液:90毫升
  蛋白胨:1克
  氯化鈉:0。5克
  磷酸二氫鉀:0。15克
  (此自制培養基可以高壓滅菌)。
  加瓊脂配成固體,一般1%即可!
 

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