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免疫層析分析技術快速檢測谷物中的黃曲霉B1

閱讀:1721      發布時間:2020-3-23
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黃qu霉毒素 B1(Aflatoxin B1 簡寫為 AFB1)是目前已知的化學物質中致癌性zui強的一種。黃qu霉毒素 B1 對人和若干動物具有qiang烈的毒性,其毒性作用主要是對肝臟的損害。國家質檢總局規定黃qu霉毒素 B1 是大部分食品的必檢項目之一。

本品采用高度特異性的抗體抗原反應及免疫層析分析技術,通過單克隆抗體競爭結合 AFB1-BSA 偶聯物和樣品中可能含有的 AFB1 的原理。試劑含有被事先固定于膜上測試區(T)的 AFB1-BSA 偶聯物和被膠體金標記的抗 AFB1 單克隆抗體。

實驗方法:

一、樣品制備

取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過 20 目篩,準確稱取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min。4000rpm 離心 1min 得上清液,將上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸發皿或小玻璃杯中,用電吹風吹干上清液。根據樣品的種類按以下規定的稀釋液量,用鋁箔袋內配套吸管反復沖洗,*溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測液。考慮不同樣品對黃qu霉毒素 B1 的zui

高含量要求,請參考下表進行用稀釋液溶解杯底固體:

二、實驗步驟

1. 在進行檢測前先完整閱讀使用說明書,使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復至室溫;

2. 從原包裝袋中取出試紙卡,打開后平放在桌面上,請在 1 小時內盡快使用;

3. 用吸管吸取待檢樣品溶液,滴加 3 滴于加樣孔中,加樣后開始計時;

4. 結果應在 10min 內讀取,超過 12min 的時間判讀無效。

三、結果判定

1. 陽性:位置 C 顯示出紅色線條,而位置 T 不顯色時,或者位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 顯示顏色非常模糊時,判為陽性。陽性結果表明:AFB1 含量超過樣品允許量。

2. 陰性:位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 同時顯示出紅色線條,且 T 線顏色接近 C 線或者深于 C 線時,判為陰性。陰性結果表明:AFB1 含量低于

樣品允許量。

3. 無效:位置 C 不顯示出紅色線條,而位置 T 顯示出紅色線條,該試紙卡視為無效。建議使用新的試紙卡按本說明書要求重新測試。

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