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1335次免疫組化準備
zui重要的是選擇好一抗、二抗或者還有三抗,注意抗體的特異性、效價和交叉反應,用單抗。
其他常用試劑有:
1、0.01M(pH7.4)的磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS),稀釋抗體和洗片子用;
2、清潔液、純水,洗玻片用
3、多聚賴氨酸處理載玻片,防止脫片
4、固定液:4%多聚甲醛或冷丙酮等;
5、15%~30%蔗糖,組織脫水用;
6、梯度酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋,或者OCT包埋做冰凍切片;
7、抗原修復液:枸櫞酸緩沖液(pH6.0);
8、活化劑:EDTA或者Triton X-100;
9、1%~10%牛血清清蛋白(BSA)封閉液;
10、H2O2,滅活內源性過氧化物酶;
11、顯色液:根據你做的酶來選擇,如果是HRP就用DAB,如果是AKP,就用NBT/BCIP,免疫熒光則不需要;
12、50%緩沖甘油封片液。
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