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配置培養基過程中常見的問題2024/1/22
一、培養基顏色不正確（1）含有酸堿指示劑的培養基，若顏色不正確，通常是由于pH不正確導致的，加熱過度、錯誤的滅菌方式等都會導致此項問題。（2）加熱過度導致某些成分分解或糖焦化，如SC培養基(SC增菌液...
冰凍切片免疫熒光實驗2024/1/15
1、冰凍切片固定冰凍切片37℃烘烤10至20分鐘，控干水分，置于4%多聚甲醛固定30min。于PBS緩沖液中晃動洗滌3次，每次5分鐘。2、抗原修復將切片浸沒在升滿EDTA抗原修復緩沖液（PH8.0）的...
RNA提取原理與詳細步驟2024/1/8
原理用Trizol的溶液提取，將總RNA與DNA和蛋白質分離。Trizol是一種酸性溶液，含有硫氰酸胍(GITC)、苯酚和氯仿。GITC不可逆地使蛋白質和RNase變性。隨后進行離心。在酸性條件下，總...
蛋白酶K的作用及保存方法2024/1/2
作用：蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用，以增強探針與靶核酸結合的機會，提高雜交信號。但蛋白酶K濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時，都會對細胞結構有一...
免疫熒光實驗中細胞爬片如何使用2023/12/25
首先是玻片的處理，普通的蓋玻片用砂輪劃成自己要的大小的小方塊，先用洗衣粉洗干凈，用水沖靜烤干，然后泡酸過夜，撈酸后流水洗凈，烤干，置于器皿中高壓滅菌，然后再烤箱中大約8小時烤干備用。爬片可以在培養皿六...
胎牛血清的功能有哪些？2023/12/20
胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清是高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。胎牛血清的功能...
胰蛋白酶如何在細胞培養中發揮作用2023/12/15
胰蛋白酶是一種消化酶，可分解許多脊椎動物消化系統中的蛋白質。它存在于胰液中。如何在細胞培養中發揮作用質膜上的蛋白質負責多種功能，這些功能對于維持細胞的正常生理活動至關重要。一些質膜蛋白（如鈣粘蛋白家族...
如何使用細胞分離液2023/12/11
細胞分離液的配置與使用：1、不同濃度分離液的制備:先用9份分離液與1份8.5％NaCl或1.5MPBS混合達到生理性滲透壓，然后用生理溶液稀釋到所需濃度。2、不連續密度梯度層的制備:先將試管壁用牛血清...
緩沖液配制操作流程2023/12/4
定義：緩沖溶液指的是由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液，能在一定程度上抵消、減輕外加強酸或強堿對溶液酸堿度的影響，從而保持溶液的pH值相對穩定。以常用的PBS磷酸緩沖溶液(不含鈣、鎂離子)為例，簡...
ELISA（酶聯免疫吸附）原理及步驟詳解2023/11/29
酶聯免疫吸附實驗1.原理：免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發生的高選擇性高特異性識別和結合原理，對待測抗體或者抗原進行分析測定的方法，酶聯免疫吸附分析（下稱ELISA）是免疫分析的一種，分三個...
免疫熒光染色步驟和原理2023/11/22
免疫熒光染色是一種常用的細胞和組織學研究技術，它利用特異性抗體與標記熒光染料結合，來檢測和定位細胞中的特定蛋白質或其他分子。以下是免疫熒光染色的步驟和原理：步驟：1.細胞或組織樣品的固定：通常使用甲醛...
什么是離心管，需要注意哪些事項？2023/11/15
離心管(CentrifugeTube)是實驗室中常用的一種實驗耗材，主要用于離心實驗。離心管按大小可分為微量離心管和普通離心管，可以承受高速旋轉產生的離心力，通常微量離心管離心力測試最高可達21000...
在試驗中ELISA試劑盒的條件挑選2023/11/10
在ELISA試劑盒中，進行各項試驗條件的挑選是很重要的，其間包括:（1）固相載體的挑選：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。現在常用的...
電泳緩沖液的特點是什么？有何作用？2023/11/3
電泳緩沖液是核酸、蛋白質凝膠電泳系統的一個重要組成，是電泳場中的導體，也是維持電泳系統恒定pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。電泳緩沖液的特點：1.TAE是使...
脂質體轉染的特征有哪些？2023/11/1
定義：最初，人們只是運用脂質體模擬生物膜，研究膜的構造及功能，從而發現了膜的融合及內吞作用，因而可用作外源物質進入細胞的載體。特性：陽離子脂質體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過靜電作用將DNA分子包...
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