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【經驗總結】氣相色譜儀柱前衍生化的常見方法總匯

時間:2019/12/31閱讀:3961
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 氣相色譜儀衍生化技術是通過化學反應將樣品中難于分析檢測的目標化合物定量的轉化為另一種易于分析檢測的化合物,通過后者的分析檢測可以對目標化合物進行定性和定量分析。

 

氣相色譜儀

 

柱前衍生化的條件

首先,如果要是想在色譜中使用柱前衍生化,其衍生化反應應該滿足以下幾個條件:

1、反應能迅速、定量的進行,反應重復性好,反應條件不苛刻,容易操作;

2、反應的選擇性高,只與目標化合物反應,即反應具有專一性;

3、衍生化反應產物只有一種,反應的副產物和過量衍生化試劑不干擾目標化合物的分離與檢測;

4、衍生化試劑方便易得,通用性好。

 

氣相色譜儀

 

氣相色譜儀常見的衍生化反應

1、酯化衍生化方法

(1)甲醇法:有機酸與甲醇在催化劑條件下加熱,發生酯化反應,生成有機酸甲酯。一般采用氟化硼作催化劑,通常將氟化硼通入甲醇配制酯化劑,因為配置過程中以放熱,有一定的危險性,現在也有商品化的氟化硼甲醇溶液可直接購買使用。

(2)氮甲烷法:氮甲烷可以與有機酸反應生成有機酸甲酯放出氮氣。此法簡便有效,反應速度快,轉化率高,較少副反應,不引入雜質,但是反應要在非水介質中進行。雖然反應條件溫和,但是氮甲烷不穩定,有爆炸性、有毒,制備與使用時要特別小心。另外,酚羥基在常溫下可以與氮甲烷反應,但在0℃下可以避免酚羥基反應。

(3)三酸酐法:在三酸酐的存在下有機酸和酸可以反應生成酯,比較適合空間位阻較大的有機酸和醇或酚的酯化。

(4)其他酯化法:有時為了提高方法的靈敏度和選擇性,需要制備甲酯之外的酯,方法與甲酯化方法類似,可以用氮乙烷、氮丙烷、氮甲苯代替氮甲烷以制得相應的酯,且這些實際的穩定性好、爆炸性小。用氟化硼的丙醇、丁醇或戊醇溶液與有機酸反應也可以制得相應的丙酯、丁酯或戊酯。

 

氣相色譜儀

 

2、酰化衍生化方法

酰化能降低羥基、氨基、巰基的極性,改善這些化合物的色譜性能,并提高這些化合物的揮發性,增加某些易氧化化合物的穩定性。當酰化時引入含有鹵離子的酰基時,還可以提高使用ECD檢測器的靈敏度。常用的酰化試劑有酰鹵、酸酐和反應活性的酰化物。

 

氣相色譜儀

 

3、鹵化衍生化法

在目標化合物中引入鹵原子后可使用ECD檢測器,提高檢測的靈敏度,同時可以改善揮發性和穩定性,常用的鹵化衍生化方法如下:

(1)鹵素法:用鹵素直接作為衍生化試劑處理樣品,鹵素的作用是加成或取代

(2)鹵化氫法:常用HCl和HBr為衍生化試劑與不飽和鏈發生加成反應或與羥基發生置換反應

(3)N-溴代丁二酰亞胺(NBS)法:NBS是選擇性很強的鹵化衍生試劑,可使烯丙位的氫原子發生溴代反應

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