青島普瑞邦生物工程有限公司
液相色譜柱后衍生法，豆豉、腐乳中黃曲霉毒素檢測
檢測樣品：豆豉 腐乳
檢測項目：黃曲霉毒素
方案概述：針對豆豉、腐乳基質可能存在難凈化、雜質多的特點，普瑞邦技術工程師根據(jù)《GB5009.22-2016食品安全國家標準食品中黃曲霉毒素B族G族的測定》中半流體樣品實驗方法及參考文獻，進行了免疫親和柱與多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化對比驗證實驗
針對豆豉、腐乳基質可能存在難凈化、雜質多的特點，普瑞邦技術工程師根據(jù)《GB 5009.22-2016 食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素B族G族的測定》中半流體樣品實驗方法及參考文獻，進行了免疫親和柱與多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化對比驗證實驗，具體實驗過程如下：
【標準品】黃曲霉毒素混合標準工作液：1ug/mL
【樣品處理】
| 樣品 | 豆豉（a）腐乳（b） | |||
| 編號 | a1（b1） | a2（b2) | a3（b3) | a4(b4) |
| 處理過程 | 20mL70%甲醇水 | 20mL84%乙腈水 | ||
| 超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩 20min | ||||
| 超速離心10min，上清液備用 | ||||
| 取提取液4mL過M160固相凈化柱 | / | 取提取液4mL過M160固相凈化柱 | / | |
| 取2mL過柱后液體加18mL水稀釋 | 取提取液2mL加18mL水稀釋 | 取2mL過柱后液體加18mL水稀釋 | 取提取液2mL加18mL水稀釋 | |
| 全部過普瑞邦免疫親和柱，最終2mL甲醇定容上機 | ||||
| 加標水平 | 5mg/L | |||
液相譜圖如下：
b1:腐乳70%甲醇提取過多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化
b2:腐乳70%甲醇提取只過免疫親和柱凈化
b3:腐乳84%乙腈提取過多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化
b4:腐乳84%乙腈提取只過免疫親和柱凈化
a1:豆豉70%甲醇提取過多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化
a2:豆豉70%甲醇提取只過免疫親和柱凈化
a3:豆豉84%乙腈提取過多功能凈化柱-免疫親和柱雙柱凈化
a4:豆豉84%乙腈提取只過免疫親和柱凈化
【實驗結果】
通過實驗驗證，按照以上前處理流程，84%乙腈或70%甲醇提取后，過免疫親和柱就能達到凈化效果，但是70%甲醇提取腐乳、豆豉兩種基質回收率偏低，建議實驗過程為84%乙腈提取后過免疫親和柱凈化。
【采購指南】
【液相條件】
流動相：甲醇：水 = 45:55
色譜柱：Pribolab真菌毒素檢測專用柱（C18，250×4.6 mm，5 μm）
流速：1.0 mL/min
進樣量：10 μL
光化學柱后衍生器：Pribolab® KRC
激發(fā)波長：360 nm，發(fā)射波長：440 nm。
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