Edman降解的歷史、現(xiàn)狀與未來發(fā)展趨勢檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì的功能由其結(jié)構(gòu)決定，而結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)是一級序列。早在20世紀(jì)中葉，當(dāng)人類尚未掌握測序DNA的能力時，蛋白測序已經(jīng)開啟生命結(jié)構(gòu)的探索旅程。而這一切的開端，離不開一個關(guān)鍵發(fā)明：Edman降解法。七十余年來，Edman降解見證了從人工手動操作到自動化分析的演進(jìn)，也在質(zhì)譜席卷蛋白組學(xué)時代后找到新的定位。本文將帶你回顧其技術(shù)演變，洞察它在當(dāng)代研究中的角色，并探討其與未來蛋白結(jié)構(gòu)研究的融合之路。

一、歷史溯源：從手工測序到自動化的技術(shù)飛躍

1、1950年：Pehr Edman 提出化學(xué)降解測序法

瑞典科學(xué)家Pehr Edman在1950年shǒucì描述了一種從N端逐步釋放并識別氨基酸殘基的方法，開創(chuàng)了蛋白測序的先河。其核心在于苯異硫氰酸（PITC）與N端氨基酸反應(yīng)，形成可分離識別的PTH-AA衍生物。

2、1960-70年代：逐步實現(xiàn)自動化測序儀（Sequenator）

通過與高效液相色譜（HPLC）聯(lián)用，Edman降解實現(xiàn)了循環(huán)自動化測序，可測定多達(dá)30個氨基酸的序列，精度和重現(xiàn)性大幅提升。

3、1990年代起：質(zhì)譜興起，Edman降解退居“驗證工具”

隨著ESI與MALDI等軟電離質(zhì)譜技術(shù)的普及，質(zhì)譜測序（尤其是de novo分析）在效率、通量、修飾識別能力上全面超越Edman法。后者逐漸轉(zhuǎn)向小規(guī)模驗證用途，尤其擅長識別N端序列、蛋白標(biāo)簽、信號肽等精細(xì)結(jié)構(gòu)。

二、從主角轉(zhuǎn)向“jīngzhǔn補刀”的結(jié)構(gòu)驗證工具

1、Edman降解仍被廣泛應(yīng)用于以下場景：

（1）蛋白N端驗證與起始位點確認(rèn)

→ 檢測表達(dá)蛋白是否包含預(yù)期標(biāo)簽、信號肽是否被剪切

（2）抗體或融合蛋白構(gòu)建驗證

→ 檢測Fab、Fc區(qū)域是否拼接正確

（3）翻譯后修飾屏蔽的序列解析

→ 在某些N端修飾較輕或易逆反應(yīng)樣品中，仍可獲得準(zhǔn)確結(jié)果

（4）支持質(zhì)譜測序結(jié)果驗證

→ 在新序列/無參考數(shù)據(jù)庫情境中，提供輔助驗證維度

2、仍需注意的技術(shù)限制：

在百泰派克生物科技，我們將Edman測序與高分辨率質(zhì)譜整合，打造適合藥物研發(fā)需求的“蛋白結(jié)構(gòu)確證+標(biāo)簽驗證”一體化解決方案。

三、未來趨勢：Edman降解的智能化、整合化發(fā)展路徑

1、與質(zhì)譜聯(lián)用，實現(xiàn)雙平臺互補

現(xiàn)代蛋白測序趨勢是：jīngzhǔn+高通量+多修飾識別并重。Edman降解無法單獨滿足這些要求，但可作為：

* De novo測序結(jié)果的N端驗證工具

• 質(zhì)譜識別結(jié)果中的翻譯起始位點補強手段

• 高通量篩查后的關(guān)鍵序列確認(rèn)技術(shù)

2、儀器自動化與微量測序的結(jié)合

新一代自動Edman降解儀搭載微流控芯片技術(shù)，使得樣品用量從微克級降至納克級，大幅擴展其適用范圍。未來或可拓展至：

* 單細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物驗證

• 高通量表達(dá)克隆庫篩選

3、AI輔助序列解析與整合分析平臺構(gòu)建

AI算法正在參與dànbáizhì結(jié)構(gòu)預(yù)測與數(shù)據(jù)整合。若將Edman測序數(shù)據(jù)、質(zhì)譜碎片譜圖與AlphaFold預(yù)測序列協(xié)同分析，將為復(fù)雜蛋白變異解析帶來更高精度的輔助工具。

盡管Edman降解不再是主流蛋白測序技術(shù)，但其在jīngzhǔn、低背景、高特異性識別N端序列方面仍具有bùkětìdài的地位。在抗體藥、疫苗、生物類似藥等新一代藥物研發(fā)中，Edman降解作為質(zhì)譜的有力補充，正煥發(fā)新的技術(shù)生命力。憑借zhuānyè的技術(shù)團隊和7大質(zhì)量控制檢測平臺，百泰派克生物科技為從事dànbáizhì組學(xué)研究的科研人員提供高質(zhì)量Edman降解分析服務(wù)，獲得廣泛認(rèn)可。

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù)，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù)，對蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上先進(jìn)的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實驗分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實驗結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)先進(jìn)，填補技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細(xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實現(xiàn)了數(shù)量級的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務(wù)。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報注冊和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù)；

2.獲國家CNAS實驗室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

Edman降解的歷史、現(xiàn)狀與未來發(fā)展趨勢檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹