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3420-2APT-2 ELISpot Pro: Human IFN?γ (ALP)人干擾素檢測

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  重慶正楓合生物科技有限公司,以下簡稱”正楓合”,于2022年創立。正楓合專注于生命科學領域試劑、耗材等實驗用品的推廣與銷售。銷售產品線涉及免疫學、細胞生物學、分子生物學試劑與耗材,銷售品牌主要有:Thermofisher,Corning,BI,Vivacell,斯博利康,TBD,TAKARA,FUJIFILM,IRVINE,WAKO,潔特等。

細胞培養相關試劑耗材

供貨周期 兩周 貨號 3420-2APT-2
應用領域 醫療衛生,食品/農產品,生物產業,制藥/生物制藥

ELISpot Pro: Human IFN?γ (ALP)人干擾素檢測

MABTECH ELISPOT 實驗原理

ELISPOT 實驗使用 PVDF 膜為底的 96 孔板(cat:MSIPS 4510,Millipore),包被上特異性單克隆抗體(需要無毒,不含內毒素,親和力高的抗體),以捕獲細胞分泌的細胞因子。

然后在培養板的孔內加入待檢測的細胞和抗原刺激物進行培養。在刺激物的刺激下,T 細胞就會在對應的時間段分泌對應的細胞因子。此時細胞因子就被包被在膜上的抗體所捕獲。

洗去細胞后,被捕獲的細胞因子可以與biotin標記的第二抗體結合,然后用酶標親和素與biotin結合,進行化學酶聯顯色,就可以在膜的局部形成一個個圓形的斑點(當然,也可以使用熒光素標記的第二抗體,這樣就省去了后續的化學顯色方法,并且一次可以檢測多種細胞因子),每一個斑點就對應了當初一個分泌細胞因子的細胞。

統計膜上的斑點的數目,再除以當初加入孔內的細胞總數,就可以計算出陽性細胞的百分比。

MABTECH該技術有以下三大優點:

一:靈敏度高。一百萬個細胞中只要有一個細胞分泌細胞因子就可被檢測出來,相對于傳統的 ELISA 方法提升了 2~3 個數量級。

二:單細胞水平,活細胞功能檢測。ELISPOT 是用抗原直接刺激活細胞,檢測的是活細胞的功能。

三:操作簡便經濟,可進行高通量篩選。ELISPOT 沒有復雜的細胞體外擴增過程,不使用同位素,按照標準化的實驗操作,一個實驗者可以同時處理數百個樣品,效率遠遠高于其它檢測方法。

ELISpot Pro: Human IFN?γ (ALP)人干擾素檢測

MABTECH :3420-2APT-2包括:

Pre-coated plates, mAb 1-D1K(2 clear plates) Detection mAb: 7-B6-1, ALP (150 μl)

BCIP/NBT-plus substrate(25 ml)

Positive control: Anti-CD3 mAb (CD3-2) (100 μl)


?


The kit is intended for enumeration of cells secreting human IFN-y using the ELISpot assay.
ComponentsConcentrationAmount
Capture mAb 1-D1K1 mg/ml600 μ
Detection mAb 7-B6-1,biotin1 mg/ml50 μl
Streptavidin-ALP50μl




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