BP6021 脫氫酶試劑盒 其他系列-常備現貨
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BP6021
- 產地
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2025/5/4 9:42:08
- 訪問次數 68
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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T/48S |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BP6021 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 脫氫酶試劑盒 |
脫氫酶（dehydrogenase, DHA）試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：
脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質氧化還原反應的酶，催化底物通過細胞色素系統被氧化，釋放的能量供機體使用，是生物體取得能量的一種方式。
測定原理：
在細胞呼吸過程中，氫受體 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在脫氫酶作用下接受氫以后，被還原為三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF 呈現紅色，在波長 485nm處有最大吸收峰，采用分光光度法于 485nm 測定其吸光值，即得脫氫酶活性。
脫氫酶試劑盒 其他系列-常備現貨
試劑的組成和配制：
產品名稱 | BP6021-50T/48S | Storage |
提取液：液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一：粉劑 | 1 瓶 | 4℃避光 |
試劑二：液體 | 20ml | 4℃ |
試劑三：甲醇 | （自備） | -- |
說明書 | 一份 | |
試劑一：粉劑×1 瓶，使用前加 10ml 試劑二溶解，4℃避光保存（盡量現配現用）。
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
需自備儀器和用品：
篩子、天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、冰、蒸餾水、甲醇（不允許快遞，請用戶自備）。
樣品處理：
1、細菌、真菌：按照細胞數量（104 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 8000g， 4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。
2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml提取液）進行冰浴勻漿，然后 8000g，4℃，離心 20min。
3、液體：直接檢測。
測定步驟：
空白管 | 測定管 | |||
樣品（μl） | 150 | |||
蒸餾水（μl） | 150 | |||
試劑一（μl） | 150 | |||
試劑二（μl） | 150 |
充分混勻，37℃培養 24h
試劑三（μl） | 1350 | 1350 |
振蕩 1h，8000g，25℃，離心 5min，取 1ml 上清于比色皿，測定A485，△A=A 測定-A 空白管。空白管只要做一管。
脫氫酶活力計算：
標準曲線：y = 0.0422x - 0.0312；R2 = 0.9988；x 為標準品濃度（μg/ml），y 為吸光值。
1. 按照蛋白濃度計算
酶活單位定義：在 37℃時，每mg 蛋白樣品每min 催化產生 1μgTF 為一個酶活性單位。
DHA（μg/ min / mg prot）=（△A+0.0312）÷ 0.0422×V 反總÷（Cpr×V 樣）÷T= 0.181×（△A+0.0312）÷Cpr
2. 按照樣本質量計算
酶活單位定義：在 37℃時，每克樣品每min 催化產生 1μgTF 為一個酶活性單位。
DHA（μg/ min /g 鮮重）=（△A+0.0312）÷ 0.0422×V 反總÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T= 0.181×（△A+0.0312）÷W
3. 按液體體積計算
酶活單位定義：在 37℃時，每ml 樣本每min 催化產生 1μgTF 為一個酶活性單位。
DHA（μg/ min /ml）=（△A+0.0312）÷ 0.0422×V 反總÷V 樣÷T= 0.181×（△A+0.0312）
V 反總：反應總體積，1.65ml；V 樣：加入反應體系中樣本體積，0.15ml；T：培養時間，1d=1440min；W：樣品質量，g； Cpr：蛋白濃度，mg/ml。
注意事項：
配制好的試劑一避光保存于 4℃，最好在一周內使用，若出現紅色，則不能使用。
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