山li醇含量試劑盒說(shuō)明書(shū)

分光光度法 50 管/48 樣

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

山li醇廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，不僅是糖運(yùn)輸形式之一，而且與生物抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān)。因此，在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測(cè)山li醇含量變化。

測(cè)定原理：

山li醇在堿性溶液中與銅離子形成藍(lán)色絡(luò)合物，在 655nm 波長(zhǎng)有特征吸收峰。

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組成：

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

山li醇的提取：

按照組織質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.2g 組織，加入 2ml 蒸餾水），研磨成勻漿， 95℃水浴 10 分鐘（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后，8000g，25℃離心 10min，取上清液待測(cè)。

測(cè)定步驟：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 655nm，蒸餾水調(diào)零。

2、加樣表（在EP 管中依次加入下列試劑）：

混勻后室溫靜置 15min，8000g，25℃離心 10min，取上清液測(cè) 655nm 下吸光值A，計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A空白管。空白管只要做一管。

山li醇含量計(jì)算：

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為 y = 0.352x - 0.002；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml），y 為吸光值。

2、按照樣本質(zhì)量計(jì)算

山li醇含量（mg /g 鮮重）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA＋0.002) ÷W

3、按照樣本蛋白濃度計(jì)算

山li醇含量（mg /mg prot）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA＋0.002) ÷Cpr

V1：加入樣本體積，1ml；V2：加入提取液體積，2 ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g

注意：zui低檢測(cè)限為 1μg/g 鮮重或 0.01μg /mg prot

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