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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業(yè)專用試劑>生物試劑> 轉基因大豆MON87705品系試劑盒(熒光-PCR法)

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轉基因大豆MON87705品系試劑盒(熒光-PCR法)

具體成交價以合同協(xié)議為準

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!


上海滬崢生物科技有限公司是一家集研發(fā),生產,銷售為一體的企業(yè),自公司成立以來,每年的銷售額保持高速增長,企業(yè)規(guī)模不斷擴大,生產加工和銷售的產品包括ELISA試劑盒,標準品和對照品,醫(yī)藥中間體,培養(yǎng)基,各種化學試劑,生化試劑等實驗耗材等萬余種。公司擁有專業(yè)的技術研發(fā)團隊,長期力于ELISA試劑盒、生物試劑的研發(fā),為客戶提供引物設計與合成、免疫組化、PCR定量服務等一系列實驗代測服務。上海滬崢嚴格遵守“質量用心、客戶用心、技術有心、服務用心”等企業(yè)原則。公司產品已被廣泛應用于化學、化工、生命科學的基礎研究和開發(fā)應用、制藥、疾病診斷與控制、人口與健康、生物技術等諸多領域,并銷往全國各地。公司客戶遍布國內各大學、醫(yī)院、研究所、衛(wèi)生防疫、制藥公司、生物公司等單位,得到廣大客戶的*好評。我們的宗旨是“為客戶提供*質的產品和服務”。 上海滬崢生物以技術為核心并擁有完善的市場營銷體系、現(xiàn)代化管理體系和專業(yè)化物流配送系統(tǒng),較大程度滿足國內外生命科研人員的產品需求。公司專門設立優(yōu)質完善的客服中心及技術中心,*時間為客戶解決技術支持、產品跟蹤以及售后等相關問題,旨在生命科學和醫(yī)學科學研究領域創(chuàng)造具有競爭力的自主知識產權品牌產品。歡迎社會各界朋友前來洽談業(yè)務,共創(chuàng)輝煌!




ELISA試劑盒,生化試劑,標準品/對照品,血清,細胞,抗體,培養(yǎng)基

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 HXG740 應用領域 生物產業(yè)
主要用途 科研使用

       轉基因大豆MON87705品系試劑盒(熒光-PCR法)

產品名稱】

通用名稱:轉基因大豆 MON87705 品系核酸檢測試劑盒 (熒光-PCR 法)

Name :Diagnostic Kit for MON87705 Gene DNA (Real-Time PCR Method)

【包裝規(guī)格】50T/盒

本試劑盒適用于檢測轉基因植物的 MON87705 基因,用于篩查待檢測植物中是否含有 MON87705 成分。其檢測結果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒用國家標準的 MON87705 特異性引物和探針,用熒光 PCR 技術進行轉基因成分的檢測。

【試劑組成】

規(guī)

酶液

50μL×1 管

MON87705 反應液

500μL×2 管

MON87705 陽性質控品

50μL ×1 管

陰性質控品

250μL ×1 管

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

-20℃避光保存、運輸、避免反復凍融,反復凍融次數(shù)不超過 5 次。有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本采集】稱取 200g 樣品。【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標本運送應采用 0℃

轉基因大豆MON87705品系試劑盒(熒光-PCR法)使用方法】

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1 樣本前處理

固體樣本:用粉碎機或冷凍研磨儀將樣品研磨至細粉狀。

1.2 DNA 提取

對于固體標本,DNA 的提取可以采用 SN/T 2584-2010 中推薦的方法:

1) 每個樣品取 2 個平行管。稱取 200mg 粉碎的樣品,加入 1mL 預冷至 4℃的抽提液,劇烈搖動混勻后,在冰上靜止 5min,4℃條件下 10000g 離心 15min,棄上清液;

2) 加入 600μL 預熱至 65℃的裂解液,充分重懸沉淀,在 65℃恒溫保持 40min, 期間顛倒混勻 5 次;

3) 室溫條件下10000g 離心10min,取上清液轉移至新離心管中,加入5μLRNAseA 37℃恒溫 30min,分別用等體積苯酚:異戊醇溶液:異戊醇溶液各抽提一次;

4) 室溫條件下,10000g 離心 10min,取上清液至新離心管,加入三分之二體積的異丙醇,十分之一體積的 3mol/L 的乙酸鈉溶液(pH=6.5-20℃放置 2-3h

5)  4℃條件下,10000g 離心 15min,棄上清液,用 70%乙醇洗滌沉淀一次,倒出乙醇,晾干沉淀;

6) 加入 50μL TE(pH8.0)溶解沉淀,所得溶解即為樣品 DNA 溶液。也可使用等效的 DNA 提取試劑盒。

油脂樣本請直接選用市售油脂 DNA 提取試劑盒,按說明操作。

2. 試劑配制(試劑準備區(qū))

根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:

試劑

MON87705 反應液

酶液

用量

20μL

1μL

3. 加樣(樣本處理區(qū))

將步驟 1 提取的 DNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL,加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR 擴增(核酸擴增區(qū))

4.1 將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;

1.1 設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25μL;熒光通道選擇: 檢測通道

Reporter Dye)FAM 淬滅通道Quencher Dye)選擇 NONE,請勿選擇 ROX 參比熒光。

1.2 推薦循環(huán)參數(shù)設置:

步驟

循環(huán)數(shù)

溫度

時間

收集熒光信號

1

1 cycle

95℃

10min

2

40 cycles

94℃

15sec

55℃

30sec

轉基因大豆MON87705品系試劑盒(熒光-PCR法) 結果分析判定

結果分析條件設定

設置 Baseline  Threshold:一般直接按機器自動分析的結果分析,當曲線出現(xiàn)整體傾斜時,根據(jù)分析后圖像調節(jié) Baseline  start (一般可在 3~15 范圍內調節(jié))、stop (一般可在 5~20 范圍內調節(jié)),以及Threshold  Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結果。

 結果判斷

陽性:檢測通道 Ct ≤35,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線;

可疑:檢測通道 35<Ct ≤38,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 35<Ct ≤ 38,且曲線有明顯的增長曲線,判定為陽性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。

3. 質控標準

陰性質控品:Ct>38 或無 Ct 值顯示;

陽性質控品:擴增曲線有明顯指數(shù)生長期,且 Ct 值≤32; 以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。






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