ELISPOT酶聯免疫斑點技術使用

淋巴細胞受到抗原刺激后局部產生細胞因子，此細胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(預包被的)的特異性單抗捕獲。去除細胞后，被捕獲的細胞因子與Biotin標記的單抗結合，其后再與堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶標記的親和素結合。加底物顯色后，PVDF膜上出現紫色或紅褐色的斑點表明細胞產生了細胞因子，通過酶聯免疫斑點分析儀（ELISPOT Reader）對斑點的進行自動計數和分析。

德國biosys由化學家兼工程師Werner Freber創建于1986年，專注于 EliSpot酶聯免疫斑點計數和定量自動化檢測分析設備30多年，biosys公司的立體3D雙光照明（增強斑點與背景的對比度，有效抑制板孔側壁反光造成的“幻影現象”，提高檢測度），能進行單斑點、每孔光密度測定以定量細胞因子分泌的照明系統，解決了ELISPOT斑點計數的快速化，標準化和斑點信息的詳細化，并且可以對細胞因子進行定量分析，是能進行單斑點、每孔光密度測定以定量細胞因子分泌的照明系統，獲得應用于ELISPOT斑點識別的3D雙光源技術，實現對ELISPOT膜板和ELISPOT透明板的良好識別，個采用改進機械結構的前置式載物臺和自動開關密閉檢測室，同一孔中同時識別多至12色ELISPOT斑點，實現熒光ELISPOT檢測，歐盟科技項目,產品成熟，30年歷史，1000多家實驗室使用，國內近百家單位使用，已成為熒光/Elispot酶聯免疫斑點檢測分析的金標準。

世聯博研北京科技有限公司是德國BIO-SYS包含bioreader酶聯免疫斑點分析儀和biocount病毒菌落計數儀在內全系列產品在中國大陸、香港、澳門、中國臺灣區域總授權代理商，為廣大科研用戶提供BIO-SYS全系列產品提供售前、售中和售后服務

Biosys酶聯免疫斑點圖像計數和分析產品特點：

●立體3D雙光照明系統：

增強斑點與背景的對比度，有效抑制板孔側壁反光造成的“幻影現象”，提高檢測度。能進行單斑點、每孔光密度測定以定量細胞因子分泌的照明系統。
● 彩色成像及分析系統：

高分辨率2340×2000 分辨率SONY fire wire真彩數碼成像系統，可進行雙色或三色Elispot實驗結果的檢測。也適用于病毒斑(Viral Plaque)、克隆形成(CFU)、腫瘤細胞集落形成（HTCFA）,干細胞集落形成試驗等。  數據量高達5M 的圖像數據（單孔）﹑雙色以上的圖像分析功能, 一體化HP 20’ 液晶顯示器.
● 高精度X－Y定位載板臺：

采用高精度齒輪步進電機，避免了皮帶輪步進電機的打滑和老化，定位精度<0.01mm。

高精度微步進電機、齒輪傳動方式、樣品架移動精度< 0.01mm
● 通用性強：

適用各種載玻片、35-100mm培養碟、6 / 12 / 24 / 48 / 96/384孔各型培養板。對于實驗室常用的U-Cytech、MILLIPORE、NUNC、 Whatman、Greiner等公司的透明培養板、不透明（白色）培養板、以及PVDF膜培養板均適用。
● 自動聚焦：

需進行不同類型培養板的檢測時，無須手動調焦，轉換更為方便。
●高靈敏性，高特異性的優點：

動態“像素周圍識別”，模糊、彌散、過大、過小斑點以及高背景或不規則背景均可檢測。
●高分辨率：

每孔可檢測多至2000個斑點，直徑>3m 的斑點即可被有效檢測（通常設定檢測的斑點大小為20-50m）。
●邊沿識別系統：

尤其針對透明板、白色PVDF板，可有效識別板孔邊緣，保證整個板孔的計數。
●光密度值測定：

應用ELISA透光測量原理，可對每個斑點，每個孔進行光密度值測定，定量分析細胞因子分泌。
●*的WASHOUT背景補償功能：

對于背景重的培養板孔可進行自動背景補償調節。
●測量結果可信：

已經過MABTECH, U-Cytech, Diaclone, Pharmingen, R&D等公司ELISPOT產品的驗證，測量結果可信度高。
●用戶自定義參數和再分析：

用戶可根據試驗情況設置斑點識別參數，直接重新分析已掃描數據，不必重復掃描。相同參數下分析結果可重復性為+/-*。
●“One－Click”測量區域選擇：

直觀的板孔選擇界面，可輕松進行單孔、任意孔區域、全板掃描。
●智控分析方式：

用戶可手動選擇需去除的斑點，自定義需去除的破損區域或無法識別區域，測量結果更可信。
●數據分析全面：

包括培養孔原始數據如每孔斑點數、斑點幾何形狀（直徑、圓度、曲率、毛糙度）參數、每個斑點坐標、光密度（提示細胞因子量）等以及樣本均數、方差、統計學分布等多種統計數據和分析圖表。
●直接輸出模式：

可將整板圖像，單孔圖像，每孔斑點數，斑點詳細數據、分布、和統計學分析結果直接輸出到Word、Excel、Powerpoint。可選擇HTML,BMP, JPEG, PDF等多種格式。
●檢測快速：超高精度掃描每個培養板約需12-15分鐘；快速掃描每個培養板約需6-8分鐘 。
● 歐盟CE認證、符合21 CFR PART 11認證要求

●歷史悠久，產品成熟度高、文獻量大：

30多年歷史驗證，1500多個實驗室成功使用，國內有50多的單位成功使用，無技術和應用風險。

應用范圍：

單細胞解析度/體外抗原特異性T細胞頻率的準確測量，細胞因子協同表達/雙色ELISPOT，腫瘤免疫，T細胞功能研究，移植免疫等；對探索免疫系統疾病的發病機制和腫瘤免疫細胞治療評價具有重要意義。

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