A004-96T 羥基自由基清除能力測試試劑盒上?；菡\現貨
- 公司名稱 上?；菡\生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 A004-96T
- 產地
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2025/6/11 16:57:19
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上?；菡\生物科技有限公司，成立于2010年，企業宗旨“惠質產品，摯誠服務”?；菡\生物自成立以來，一直致力于為客戶提供一站式科學服務，產品覆蓋設計開發全過程，提供實驗室設計、實驗室建設、儀器設備、耗材、試劑、技術服務等專項配套服務。上?；菡\生物按照客戶的研發、生產和質量控制環節整合各種優質資源，優化資源組合，為客戶提供整體解決方案。
上海惠誠生物在上海建立研發中心，在湖北和江蘇有生產基地，在廣州和深圳建立子公司，立足上海，銷售網絡遍布全國，為客戶提供綜合服務。
“不忘初心，砥礪前行”。 上海惠誠生物經過多年不懈努力，目前產品線包括：生命科學，分析化學，生化試劑和儀器耗材?？蛻舯椴迹荷镝t藥，體外診斷，食品行業，石油化工，科研院校和研究所等領域。
特色產品：
生命科學：Crispr系列產品，組織因子，電泳預制膠，熒光染料，核酸探針，大包裝新冠抗原抗體，工業用酶
分析化學：糖化學研究，脂類分析，植物分析，聚合物分析，醫藥分析，試劑盒
生化試劑：PEG衍生物，多肽，大包裝膠體金輔料，大包裝生物醫藥輔料，通用生化試劑
儀器耗材：生物上游工藝，生物下游工藝，細胞治療，微生物監測，理化分析，公用系統。
品牌服務：
生命科學：
Abcam、AdooQ、ALPCO、Biolegend、Cytiva、Cayman、Dojindo、Immunostar、Invitrogen、Jackson、美天旎Miltenyi、Novoprotein近岸、Prozyme、R&D、SinoBiological義翹、Stratagene、SYSY、Thermo Fisher、Wako、Topoen
分析化學：
AOCS、Carotenature、CIL、DR、Elicityl、EP、Glycarbo、Larodan、Matreya、Megazyme、Nu-Chek、Olchemim、Phytolab、QCC、Reagecon、TLC、TRC、USP
生化試劑：
Aladdin阿拉丁、Avanti、Broadpharm、Focus、Laysan、LKT、Macklin麥克林、Sigma、TCI、Thermo Fisher、vivitide
儀器耗材：
湘儀、精騏、Corning、Eppordorf、浙江孚夏、力康、海爾、匯松、赫西、Mettler Toledo、Millipore、NEST、松下、Pall、Rainin瑞寧、Whatman、上海一恒
主要代理品牌以及產品
糖類標準品,脂肪酸標準品,花青素標準品,類胡蘿卜素,人乳寡糖等食品分析標準品
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | A004-96T |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫療衛生,食品/農產品,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
羥基自由基清除能力測試試劑盒上?；菡\現貨供應
（A004-96T）
一、 測定原理
金屬離子與過氧化氫通過芬頓反應生成的羥基自由基（•OH），•OH攻擊脫氧核糖并破壞其環呋喃環生成丙二醛（MDA）。丙二醛與2-硫代巴比(空格)妥酸（TBA）結合后在532nm處具有大吸收峰（Halliwell等，1987，ANAL BIOCHEM）。具體反應如下：
Fe3+-EDTA + 抗壞血酸 → Fe2+-EDTA +氧化的抗壞血酸 (1)
Fe2+-EDTA + H2O2 → OH- + •OH + Fe3+-EDTA (2)
•OH + 脫氧核糖 → 脫氧核糖碎片 MDA (3)
MDA + 2TBA → 發色體(4)
專一的羥基自由基抗氧化劑能減少羥基對脫氧核糖的攻擊，從而減少MDA產生而使發色體減少。通過測定反應終產物的吸光值即可判斷受測樣品的羥基自由基清除能力。
二、 試劑組成
試劑一：液體，2mL；
試劑二：液體，2mL；
試劑三：液體，2mL；
試劑四：液體，2mL；
試劑五A：液體，100mL；
試劑五B：淡黃色粉末；
試劑六：液體，100mL；
標準品：體系終濃度為10mM的甘露(空格)醇（雙蒸水配制），10mL。
三、 儲存條件及有效期
試劑盒-20℃可保存6個月。
四、 試劑的配制
試劑一應用液：待試劑融化后，在試劑一瓶中加入18mL雙蒸水，搖勻待用；
試劑二應用液：待試劑融化后，在試劑二瓶中加入18mL雙蒸水，搖勻待用；
試劑三應用液：待試劑融化后，在試劑三瓶中加入18mL雙蒸水，搖勻待用；
試劑四應用液：待試劑融化后，在試劑四瓶中加入18mL雙蒸水，搖勻待用；
試劑五應用液：待試劑五A融化后，將試劑五B全部倒入試劑五A中，充分搖勻溶解（若發現不好溶解，可超聲波助溶或適當加熱。如不易觀察是否全部溶解，可將試劑五A倒入燒杯中，配制好后再倒回試劑五A瓶內，避光保存）；
試劑六：直接使用；
標準液：根據實際需要，采用雙蒸水稀釋使用。
所有試劑均需現配現用！
五、 操作步驟
樣品對照孔1 | 樣品測定孔 | 空白孔 | |
樣品溶液（μL） | 200 | 200 | |
雙蒸水（μL） | 200 | 200 | |
試劑一應用液（μL） | 200 | 200 | |
試劑二應用液（μL） | 200 | 200 | 200 |
試劑三應用液（μL） | 200 | 200 | 200 |
試劑四應用液（μL） | 200 | 200 | 200 |
充分混勻，37℃水浴30min使之充分反應。
樣品對照孔 | 樣品測定孔 | 空白孔 | |
試劑六（μL） | 1000 | 1000 | 1000 |
試劑五應用液（μL） | 1000 | 1000 | 1000 |
充分混勻，100℃沸水浴15min2。
冷卻后進行比色讀數。如您具有可以測定532nm處吸光值的酶標儀，可從反應液中取出200μL于酶標板內采用酶標儀讀數；或者您也可以采用分光光度計測定532nm處吸光值。
1如樣品顏色較淺可不做樣品空白（即認為值為0）；
2建議反應15min，也可適當延長或縮短時間至10-20min，但同一批樣品加熱時間需保持一致。
六、計算公式
注： 如未做對照孔，可以將其視作為0；
七、注意事項
1. 如樣品中色素物質不是分析對象，建議先進行脫色處理，處理后樣品可不做對照孔；
2. 如不確定樣品的羥基自由基清除能力，可先做不同濃度的稀釋液進行摸索，并選擇適宜濃度進行測定，高濃度下，濃度與清除率間并不線性相關。注意，產物的不同自由基清除能力可能相差很大，可能一個化合物的超氧陰離子自由基清除能力特別好，IC50可以低于10μg/mL，但羥基自由基清除能力很差，IC50達到10mg/mL，或者根本沒有清除能力；
3. 混勻很重要，建議每加一種試劑時均充分混勻。
4. 100℃沸水浴可采用水浴鍋或者電磁爐進行加熱。加熱時可用錫紙蓋住試管管口，并用牙簽戳一個小孔。若使用一次性離心管進行實驗，切記不可將上蓋蓋死，氣體膨脹有爆裂危險！
5. 加樣順序不可顛倒！不可將試劑一至四混勻后加入樣品；
6. 本測試盒部分試劑對皮膚有一定傷害，請戴手套操作。在沸水浴時小心蒸汽燙傷；
7. 煮沸加熱時間和溫度對本測試至關重要，請務必保證所有測試管加熱時間和溫度均相同。同時請務必等待樣品冷卻到室溫時再進行讀數測定，如需快速冷卻，可采用自來水沖洗試管外壁的方法；
8. 測定羥基自由基的方法總類繁多（Halliwell等，1988，Methods of Biochemical Analysis），同一樣品采用不同方法測定時會有一定差異，因此不同方法測定的結果不能簡單比較；
9. 本測試樣品一般不可采用有機溶劑溶解！極少量也不可以！常見的有機溶劑如乙醇等，其通過本方法得到的羥基自由基清除率*，超過許多常見抗氧化劑，不可以忽略。不可使用的有機溶劑及機理參見文獻：Xican Li, 2013, Food Chemistry.
羥基自由基清除能力測試試劑盒上海惠誠現貨供應
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