RBP4 ELISA
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- 公司名稱 上海拜力生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
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- 更新時間 2025/4/21 13:24:11
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RBP4 ELISA
RBP4 ELISA是用于定量檢測生物樣本中視huang醇結(jié)合蛋白 4(Retinol Binding Protein 4,RBP4)含量的重要技術(shù)手段,在代謝性疾病研究與臨床診斷中具有關(guān)鍵價值。RBP4 是一種由肝臟合成的運輸?shù)鞍祝饕撠?zé)在血液中轉(zhuǎn)運維生素 A,同時也參與機體能量代謝調(diào)節(jié),其水平異常與胰島素抵抗、2 型糖尿病、肥胖等代謝性疾病密切相關(guān)。
RBP4試劑盒采用經(jīng)典的雙抗體夾心原理構(gòu)建。試劑盒包含預(yù)包被抗 RBP4 抗體的微孔板、RBP4 標準品、酶標記的檢測抗體、顯色底物等核心組分。檢測時,樣本中的 RBP4 首先與固相抗體特異性結(jié)合;隨后加入酶標記的檢測抗體,該抗體與已結(jié)合的 RBP4 再次特異性結(jié)合,形成 “固相抗體 - RBP4 - 酶標抗體” 的夾心復(fù)合物。經(jīng)過充分洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后,添加底物溶液,在酶的催化作用下,底物發(fā)生顯色反應(yīng),生成具有顏色的產(chǎn)物,顏色的深淺與樣本中 RBP4 的含量呈正相關(guān)。最后,通過酶標儀在特定波長下測定吸光度(OD 值),并依據(jù)標準曲線精確計算出樣本中 RBP4 的濃度。
在樣本處理環(huán)節(jié),RBP4 試劑盒適用于血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清等多種生物樣本。血清樣本采集后需室溫靜置使血液凝固,隨后離心獲取上清;血漿樣本需使用合適的抗凝劑(如肝素、EDTA),采集后及時離心分離;組織樣本需經(jīng)過研磨、勻漿、裂解和離心等步驟,獲取組織勻漿上清用于檢測;細胞培養(yǎng)上清樣本可直接離心去除細胞碎片后進行后續(xù)檢測。為確保檢測結(jié)果的準確性,所有樣本采集后應(yīng)盡快處理和檢測,若需保存,需置于 - 20℃或 - 80℃低溫環(huán)境,并避免反復(fù)凍融,防止 RBP4 降解或活性改變。
規(guī)范的操作流程是保證 RBP4 試劑盒檢測結(jié)果可靠性的基礎(chǔ)。實驗前需將試劑盒恢復(fù)至室溫平衡,保證反應(yīng)體系溫度一致;加樣過程要使用高精度移液器,精確控制樣本和試劑的添加量;溫育環(huán)節(jié)需嚴格把控溫度和時間,以促進抗原 - 抗體充分結(jié)合;洗板步驟務(wù)必徹di,避免殘留物質(zhì)干擾檢測結(jié)果;顯色與終止反應(yīng)需嚴格按照時間節(jié)點操作,在規(guī)定時間內(nèi)完成吸光度測定,從而獲得準確、穩(wěn)定的數(shù)據(jù)。