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廣州奧瑞達(dá)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第4年
PCR試劑盒的使用方法2022/08/16
一、稀釋PCR陽性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）1.注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。2.標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為7，6，5，4，3，2。3.用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。4.在7號(hào)管中加入5μL1×10E8拷貝/μL的陽性對(duì)照，充分震蕩1分
CAS編碼簡介及規(guī)則ELISA試劑盒2022/08/10
化學(xué)試劑等物質(zhì)的名稱一般都有很多，如商品名、別名、化學(xué)名、俗稱等等各不相同，各種稱呼很容易混雜，CAS號(hào)為每一種物質(zhì)分配一個(gè)號(hào)碼，這樣可以使我們的檢索更加方便。CASRegistryNumber或稱CASNumber又稱CAS登錄號(hào)，是美國化學(xué)文摘服務(wù)社(ChemicalAbstractsService,CAS)為化學(xué)物質(zhì)制訂的登記號(hào)，該號(hào)是檢索有多個(gè)名稱的化學(xué)物質(zhì)信息的重要工具，是某種物質(zhì)如化合物、高分子材料、生物序列(Biologicalsequences)、混合物或合金的8w一的數(shù)字識(shí)別號(hào)
使用說明書2022/08/10
試劑盒使用說明書說明書一般包括公司標(biāo)志及名稱、試劑盒名稱、試劑盒組成、保質(zhì)期、使用領(lǐng)域、使用方法等項(xiàng)目。說明書格式如右圖所示：①一般在頁眉頁腳處為公司的名稱及標(biāo)志；②接下來為試劑盒的名稱；③試劑盒組成中應(yīng)為試劑盒中的所有內(nèi)容，為了簡潔明了，一般以表格的形式表現(xiàn)；④操作步驟是試劑盒說明書中*重要的部分，內(nèi)容應(yīng)準(zhǔn)確、簡潔、易懂，不能包含帶有歧義的句子，更不能含糊其辭，排版上操作步驟應(yīng)將復(fù)雜的步驟拆解，使人一目了然。可以說操作步驟為試劑盒的靈魂。試劑盒的產(chǎn)生正是為了使實(shí)驗(yàn)人員能夠擺脫繁重的試劑配制及優(yōu)
酶不穩(wěn)定，有何高招2022/08/08
（1）保存濃度盡量高些，?（2）另外可以添加牛血清白蛋白等蛋白保護(hù)劑，以避免其被吸附或沉降以及被蛋白酶所降解。?（3）加入50%甘油-20度保存、避免反復(fù)凍融。?（4）還可以加入防腐劑防止長菌（注意不能用疊氮鈉，其對(duì)HRP活性有很大影響）?（5）現(xiàn)在一些公司也有商品化的酶標(biāo)保護(hù)劑供應(yīng)，可以考慮一下?酶類的穩(wěn)定性與保存方法的很大關(guān)系。干燥的制品一般比較穩(wěn)定，在低溫情況下其活性可在數(shù)日甚至數(shù)年無明顯變化，貯藏要求簡單，只要將干燥的樣品置于干燥器內(nèi)（內(nèi)裝有干燥劑）密封，保持0－4度冰箱即可。液態(tài)穩(wěn)定性
ELISA試驗(yàn)的穩(wěn)定性問題2022/08/08
1、ELISA試驗(yàn)的穩(wěn)定性問題?做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，結(jié)果老是重復(fù)性不上，相同的材料和相同的操作方法做出的結(jié)果就截然不同，上午做時(shí)其OD在1.5，下午做時(shí)就是0.9了，所以都沒有辦法下結(jié)論，為什么會(huì)差異這么大呀？?（1）多設(shè)平行空孔，請別人代勞，以判斷究竟是否操作問題?（2）對(duì)于活性非常高的包被物和酶標(biāo)記物，如果第一次選擇的范圍恰好在其平臺(tái)位置邊緣，那么在重復(fù)的時(shí)候，每次取樣帶來的微量誤差就很容易導(dǎo)致大的偏差了，特別是線性比較好的原料試劑，這個(gè)就很正常了。建議每次取樣的時(shí)候只使槍尖一點(diǎn)點(diǎn)位于液面下
血清主要成分2022/08/06
血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成，這些化學(xué)成分包括白蛋白，α1、α2、β、γ-球蛋白，甘油三酯，總膽固醇，谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。對(duì)
保存注意2022/08/06
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn)：（1）需要長期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月，由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻，此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活，除非必須，一般不建議作此熱處理，因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多，而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量，補(bǔ)體參與反應(yīng)有：細(xì)胞毒作用，平
?ELISA實(shí)驗(yàn)過程中需要注意什么2022/08/03
1.樣本處理首先對(duì)于ELISA來說，正確的處理樣本是保證檢測準(zhǔn)確性和正確性的第一步。正式實(shí)驗(yàn)之前最好使用少量的樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，可以選擇2、5、10倍稀釋樣本，選擇合適的稀釋比例進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，親身經(jīng)歷告訴大家，千萬不能圖省事，不然濃度太大超過檢測限，簡直就是賠了夫人又折兵！！！同時(shí)，樣本的保存也非常重要，保存不當(dāng)或在冰箱里保存過久的樣本，血清中l(wèi)gG可聚合成多聚體，導(dǎo)致結(jié)果偏高。建議五天內(nèi)檢測的血清樣本可短暫存放4℃，一周之后測定的血清樣本應(yīng)該低溫凍存，同時(shí)切忌反復(fù)凍融。如果是血清樣本，也要主要樣本不
ELISA試劑盒有幾種檢測方法2022/08/03
雙抗體夾心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔）。3.加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。4.加底物液顯色：于各
教你分辨多個(gè)種屬ELISA試劑盒2022/08/01
教你分辨多個(gè)種屬ELISA試劑盒ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多ELISA試劑盒：例如：ELISA檢測試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒規(guī)格：（1）96T可用做84個(gè)標(biāo)本，12個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線；（2）48T可用做42個(gè)標(biāo)本，6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線；ELISA試劑盒組成：（1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；（3）酶的底物；（4
ELISA試劑盒涉及的種類、種屬、標(biāo)本及保存方法2022/08/01
ELISA試劑盒涉及的種類、種屬、標(biāo)本及保存方法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測。ELISA試劑盒涉及的動(dòng)物種類:從兩棲類、禽類、獸類直至人類本身，包括雞、鴨、小鼠、大鼠、倉鼠、豚鼠、貓、豬、牛、羊、馬、鹿和人等，植物種類ELISA試劑盒有馬鈴薯ELISA試劑盒等。E
改良ELISA法的新進(jìn)展2022/08/01
實(shí)現(xiàn)超靈敏診斷的改良ELISA法的新進(jìn)展數(shù)字化ELISA數(shù)字ELISA是大約10年前作為一種超靈敏的檢測技術(shù)發(fā)展起來的。當(dāng)在毫微微升大小的微孔陣列中實(shí)現(xiàn)酶反應(yīng)時(shí)，在非常低的目標(biāo)濃度下可以檢測到累積的產(chǎn)物，從而實(shí)現(xiàn)單分子檢測。利用ELISA檢測到甲型流感病毒重組核蛋白的毫微摩爾濃度。應(yīng)用帶有膠體金的雙功能熒光磁性納米球(AuNPs)建立了檢測Q流感病毒的ELISA。該方法的檢出限為7.8fg/mL。已經(jīng)被描述為數(shù)字化ELISA。Akama及其同事開發(fā)了一種由數(shù)字ELISA修改的高靈敏度檢測方法，該
其他超靈敏ELISA技術(shù)2022/07/31
其他超靈敏ELISA技術(shù)*免疫復(fù)合物轉(zhuǎn)移酶免疫測定：其靈敏度是傳統(tǒng)ELISA的100倍。例如，它可以從2型糖尿病患者采集的血清中檢測谷氨酸脫羧酶自身抗體，這對(duì)于預(yù)測糖尿病發(fā)病和早期診斷有很大幫助。另一種D特的方法是一種沒有酶反應(yīng)的超靈敏檢測技術(shù)。這種檢測技術(shù)采用了一種無酶的信號(hào)放大技術(shù)，該技術(shù)基于金泡封裝的Pd-Ir納米粒子包裹的金泡，進(jìn)行無酶信號(hào)放大。LOD為fg/mL水平，比基于辣根過氧化物酶的傳統(tǒng)檢測方法低1000倍。使用納米標(biāo)記的高指數(shù)鉑金凹面納米立方體的超靈敏檢測被報(bào)道。使用這種方法，
化學(xué)發(fā)光ELISA2022/07/31
化學(xué)發(fā)光ELISA化學(xué)發(fā)光和電化學(xué)發(fā)光也可用于ELISA。阿爾茨海默病患者血漿中的淀粉樣β42（Aβ42）可通過采用化學(xué)發(fā)光底物的三明治ELISA法來測量。該檢測方法的LOD為1pg/mL。當(dāng)這種檢測方法被應(yīng)用于檢測Aβ42的商業(yè)試劑盒時(shí)，它的檢測靈敏度提高了10倍以上。研究人員開發(fā)了與金納米團(tuán)簇技術(shù)相結(jié)合的電化學(xué)發(fā)光ELISA，該技術(shù)使腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的LOD比使用傳統(tǒng)的ELISA低兩個(gè)等級(jí).銪在熒光免疫分析中的應(yīng)用三價(jià)銪離子（Eu3+）是一種有吸引力的稀土金屬，它在被有機(jī)配體螯
AgNPs在ELISA中的應(yīng)用2022/07/30
AgNPs在ELISA中的應(yīng)用納米銀顆粒（AgNPs）的使用也增加了ELISAs的檢測靈敏度。例如，因?yàn)锳gNPs具有高消光系數(shù)和強(qiáng)質(zhì)子共振吸收特性，其被認(rèn)為是一種理想的比色指示劑，例如，AgNPs可用于實(shí)現(xiàn)表面增強(qiáng)拉曼散射檢測中的優(yōu)異檢測性能。通過使用AgNPs技術(shù)，堿性磷酸酶（ALP）的LOD值為0.003U/L，而卵巢癌細(xì)胞上的糖類抗原125的LOD為1.75U/mL。使用Au-和Ag-NPs組合用于檢測諾如病毒，LOD為10.8pg/mL，與金免疫測定法和基于辣根過氧化物酶的傳統(tǒng)ELIS
AuNPs在ELISA中的應(yīng)用2022/07/30
AuNPs在ELISA中的應(yīng)用AuNPs還用于夾心式檢測中的免疫傳感蛋白。使用AuNP標(biāo)記增加了免疫復(fù)合體質(zhì)量上的表面應(yīng)力，從而大大提高了機(jī)電檢測的靈敏度。例如，使用協(xié)助侵入的ELISA開發(fā)了一種檢測乙肝病毒的方法。Invader反應(yīng)對(duì)抗原特異性的生物素化寡核苷酸進(jìn)行了擴(kuò)增，從而檢測到該抗原。寡核苷酸探針和修飾的AuNPs與invader檢測相結(jié)合。檢測靈敏度為10?11g/mL，肉眼也能觀察到。用膠體金和磁珠建立了一種超靈敏的檢測Q流感病毒A的方法。存在于25pg/mL的病毒可通過肉眼檢測到。
一種數(shù)字化ELISA2022/07/30
一種數(shù)字化ELISA。滴漏式單分子檢測是將珠子滴在顯微鏡載玻片上，并在單層膜中干燥，用于數(shù)字信號(hào)讀數(shù)。這種化驗(yàn)方法可以檢測大分子水平的蛋白質(zhì)。數(shù)字化ELISA與定量病毒生長檢測相結(jié)合，可超靈敏地檢測人類免疫缺陷病毒(HIV)-1p24蛋白，并可實(shí)現(xiàn)對(duì)p24的飛克級(jí)檢測，而不是傳統(tǒng)ELISA的皮克級(jí)限制。數(shù)字化ELISA也被用于同時(shí)檢測嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2型(SARS-CoV-2)的穗狀蛋白和核苷酸蛋白。SARS-CoV-2是一種導(dǎo)致2019年冠狀病毒(XG肺炎)感染的病毒。該檢測方法結(jié)合
檢測靈敏度2022/07/29
定義“超靈敏”對(duì)傳統(tǒng)的ELISAz強(qiáng)烈的要求是具有超靈敏檢測的能力。然而，“超靈敏”一詞經(jīng)常被曲解。其中一個(gè)原因是與聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的檢測限(LOD)進(jìn)行了比較。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)可以擴(kuò)增核酸，從而檢測出少量的DNA或RNA拷貝數(shù)。例如，實(shí)時(shí)PRC的LOD是各種核酸的幾個(gè)拷貝數(shù)/檢測。然而，實(shí)時(shí)PCR和蛋白質(zhì)檢測系統(tǒng)之間的LOD無法進(jìn)行比較，"超靈敏"一詞用于蛋白質(zhì)定量是不準(zhǔn)確的。誤解"超靈敏"的第二個(gè)原因是源于在其他各種蛋白質(zhì)檢測方法中對(duì)LOD的比較。如上所述，許多技術(shù)可以用來量化目標(biāo)蛋白
ELISA背景介紹2022/07/29
背景介紹酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是一種基于酶反應(yīng)檢測蛋白質(zhì)(如致病蛋白、抗原和抗體)的簡便方法。這種方法的潛在應(yīng)用取決于被評(píng)估的抗原-抗體反應(yīng)的特異性和強(qiáng)度。由于ELISA需要使用純化的抗原和功能特殊的抗體，因此研究人員強(qiáng)烈建議使用其他方法，如LC-MS（液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用）和各種芯片實(shí)驗(yàn)室方法。目前LC-MS診斷的發(fā)展趨勢是專注于藥物和生物標(biāo)志物(包括多肽和類固醇)的檢測，因?yàn)楹茈y制備針對(duì)這些小分子的合適抗體，基于芯片實(shí)驗(yàn)室的平臺(tái)被認(rèn)為提供了更容易的樣品制備、化學(xué)操作和反應(yīng)，并使用各種新的
自測試劑盒用法2022/07/23
抗原檢測試劑盒怎么用？1、抗原自測前準(zhǔn)備：首先要洗手消毒，用流動(dòng)清水或消毒液來清洗雙手，然后詳細(xì)閱讀了解抗原檢測試劑配套的說明書、流程以及注意事項(xiàng)。檢查檢測卡、采樣管、鼻拭子等內(nèi)容物是否有缺失或者破損，檢查試劑是否包裝完好沒有破損、是否在保質(zhì)期內(nèi)等。確認(rèn)檢測環(huán)境，交替試紙條檢測一般要求在14℃-3℃常溫條件下，避免過冷、過熱或者過度潮濕環(huán)境導(dǎo)致結(jié)果異常。抗原檢測卡拆除包裝后置于平攤、清潔處。2、采集樣本：用衛(wèi)生紙擤去鼻涕，小心拆開鼻拭子外包裝，避免手部解除拭子頭。頭部微仰，一手執(zhí)拭子尾部，貼一側(cè)
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