手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
2000型氨基酸分析儀操作全流程：從樣品處理到數(shù)據(jù)解析的標(biāo)準(zhǔn)化指南
2000型氨基酸分析儀通過(guò)離子交換色譜與柱后茚三酮衍生技術(shù)，可實(shí)現(xiàn)食品、生物樣本中17種常見(jiàn)氨基酸的高精度定量分析。本文以蛋白質(zhì)樣品檢測(cè)為例，系統(tǒng)梳理其操作步驟與關(guān)鍵注意事項(xiàng)。
一、樣品前處理：水解與衍生化
1.蛋白質(zhì)水解
稱(chēng)取100 mg蛋白質(zhì)樣品置于水解管中，加入10 mL 6N鹽酸及3-4滴苯酚，抽真空至0 Pa后充入高純氮?dú)猓貜?fù)三次后封口。
在110°C恒溫干燥箱中水解24小時(shí)，冷卻后過(guò)濾并定容至50 mL。取1 mL濾液于60°C真空蒸發(fā)至干，用0.02N鹽酸稀釋至200 μg/mL，經(jīng)0.22 μm濾膜過(guò)濾后備用。
2.游離氨基酸處理
對(duì)于血清等液體樣品，直接用4%磺基水楊酸按1:3比例混合，4°C、10000 rpm離心15分鐘，取上清液稀釋至200 μg/mL并過(guò)濾。
二、儀器準(zhǔn)備與校準(zhǔn)
1.開(kāi)機(jī)與檢查
啟動(dòng)儀器電源，檢查氮?dú)鈮毫Γ?.05-0.1 MPa），確保緩沖液（A、B、C、D）及茚三酮溶液余量充足。
若儀器閑置超過(guò)1個(gè)月，需用吹風(fēng)機(jī)對(duì)進(jìn)樣盤(pán)及衍生模塊除濕，并更換進(jìn)樣針清洗液（10%甲醇水）。
2.參數(shù)設(shè)置
通過(guò)EZChrom Elite軟件建立分析序列，設(shè)置進(jìn)樣體積為20 μL，柱溫58°C，流速0.45 mL/min。
配置梯度洗脫程序：0-10分鐘用緩沖液A（pH 2.2），10-30分鐘線性切換至緩沖液B（pH 3.3），30-50分鐘切換至緩沖液C（pH 4.0）。
三、樣品分析與數(shù)據(jù)采集
1.進(jìn)樣與檢測(cè)
將標(biāo)準(zhǔn)品與樣品按順序放入自動(dòng)進(jìn)樣器，啟動(dòng)序列運(yùn)行。儀器自動(dòng)完成離子交換分離、柱后茚三酮衍生（115°C反應(yīng)）及光度檢測(cè)（570 nm主波長(zhǎng)，440 nm副波長(zhǎng)）。
2.數(shù)據(jù)處理
通過(guò)軟件校準(zhǔn)保留時(shí)間，刪除雜質(zhì)峰并添加目標(biāo)峰，輸入樣品總量（mg）及稀釋度。
生成報(bào)告時(shí)，系統(tǒng)自動(dòng)計(jì)算氨基酸濃度（μmol/L）及回收率（95%-105%），支持導(dǎo)出Excel或PDF格式。
四、維護(hù)與故障排除
1.日常維護(hù)
每日用超純水清洗泵及反應(yīng)管路，每周更換色譜柱保護(hù)柱芯，每月校準(zhǔn)儀器線性度（R2≥0.999）。
2.常見(jiàn)問(wèn)題處理
若基線漂移，檢查茚三酮溶液是否氧化（需現(xiàn)配現(xiàn)用）；若峰形拖尾，清洗離子交換柱（用0.1N NaOH沖洗30分鐘）。
2000型氨基酸分析儀通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化操作流程，可實(shí)現(xiàn)ppb級(jí)檢測(cè)限與±1% RSD的重復(fù)性。從樣品水解到數(shù)據(jù)輸出，每一步均需嚴(yán)格遵循參數(shù)設(shè)置與質(zhì)量控制要求，以確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心